绵羊肺腺瘤病自然病例和人工感染病例的临床病理学及分子病理学研究

论文摘要

绵羊肺腺瘤病（sheep pulmonary adenomatosis ,SPA）是由β型反转录病毒引起的一种肿瘤性传染病,世界动物卫生组织将其列为B类疾病,我国农业部列为三类疾病。本研究在对内蒙古某市种羊场绵羊肺腺瘤病进行流行病学调查的基础上,选择2个SPA自然病例带回实验室,进行临床症状观察、血液学检查、X线检查、病理剖检、病理组织学和超微病理学观察。同时用含JSRV-NM株的SPA肺肿瘤组织无细胞滤液0.3 ml气管内接种1日龄羔羊7只,经18个多月的系统观察,对存活下来的4只人工感染羊,也进行了同上的系统临床病理学研究。本研究还分别提取2只自然感染羊、4只JSRV-NM株人工感染羊、6只健康对照羊的肺组织基因组DNA,根据JSRV-NM株病毒基因组全序列,采用Primer Premier 5.0引物设计软件,在env基因TM区和LTR U3区序列设计一对引物,利用PCR方法,检测自然感染和人工感染SPA病羊肺肿瘤组织中JSRV的前病毒DNA。同时,对自然病例和人工感染病例,用流式细胞仪检测外周血中单核细胞、淋巴细胞和T淋巴细胞亚群的动态变化以及淋巴细胞和单核细胞凋亡情况。实验结果表明:（1）2只自然感染绵羊均出现了SPA典型的临床症状,“小推车试验”阳性,脉搏和呼吸频率高于正常,贫血,X线胸透发现病羊肺部有不同程度的云絮状实变区。（2）剖检可见,肺脏体积增大,表面和切面上有大小不一、质度较实的黄白色小结节,有些病例肺胸膜的脏层与壁层发生粘连,支气管、细支气管内可见白色泡沫状黏液。（3）病理组织学检查,肺泡壁上皮细胞和细支气管上皮细胞增生,呈乳头状向肺泡腔内或细支气管腔内生长,邻近肺泡腔内有大量脱落的上皮细胞。（4）透射电镜观察,病羊肺泡壁上皮细胞被大量肿瘤化的立方状上皮细胞取代,有些细胞的细胞质中发现有明显的板层小体,证明肿瘤细胞主要来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞。（5）4只人工感染绵羊均出现了一些SPA临床症状。剖检、组织学检查以及透射电镜观察,人工感染JSRV-NM株病羊所引起的主要病变及其性质,和SPA自然病例的病变及其性质相似。（6）2只SPA自然病羊PCR检测结果都为阳性,而2只健康对照羊PCR检测结果都为阴性;4只JSRV-NM株人工感染病例PCR检测结果都为阳性,而4只健康对照羊PCR检测结果都为阴性。（7）2个自然病例、4个人工感染病例,外周血中CD2+、CD4+、CD8+T细胞表现为暂短的升高,其后迅速下降,之后可反复出现起伏;而在JSRV的持续作用下,病羊体内的淋巴细胞和单核细胞呈现不同程度的凋亡和坏死。

论文目录

• 1 引言
• 1.1 绵羊肺腺瘤病概述
• 1.1.1 绵羊肺腺瘤病的发现
• 1.1.2 绵羊肺腺瘤病的病原学
• 1.1.3 绵羊肺腺瘤病的流行病学
• 1.1.4 绵羊肺腺瘤病的发病机理
• 1.1.5 绵羊肺腺瘤病的临床症状与病理变化
• 1.1.6 绵羊肺腺瘤病的诊断
• 1.1.7 绵羊肺腺瘤病的防制
• 1.1.8 绵羊肺腺瘤与人的细支气管肺泡癌
• 1.2 绵羊肺腺瘤病临床病理学研究进展
• 1.2.1 绵羊肺腺瘤病临床病理学研究的意义
• 1.2.2 绵羊肺腺瘤病的临床基本检查
• 1.2.3 绵羊肺腺瘤病的实验室检查
• 1.2.4 绵羊肺腺瘤病的特殊检查
• 1.2.5 绵羊肺腺瘤病的病理组织学观察
• 1.2.6 绵羊肺腺瘤病的超微病理学观察
• 1.3 绵羊肺腺瘤病分子病理学研究进展
• 1.3.1 绵羊肺腺瘤病分子病理学研究的意义
• 1.3.2 PCR 技术在绵羊肺腺瘤病研究中的应用
• 1.3.3 流式细胞分析技术在绵羊肺腺瘤病研究中的应用
• 1.4 本研究的目标及意义
• 2 实验一绵羊肺腺瘤病自然病例的临床病理学研究
• 摘要
• 2.1 材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 实验器具试剂
• 2.1.3 试剂
• 2.1.4 仪器
• 2.2 方法
• 2.2.1 兽医临床基本检查
• 2.2.2 实验室检查
• 2.2.3 特殊检查
• 2.2.4 病理组织学观察
• 2.2.5 超微病理学观察
• 2.3 结果
• 2.3.1 流行病学调查
• 2.3.2 临床症状检查
• 2.3.3 体温测定结果
• 2.3.4 脉搏测定结果
• 2.3.5 呼吸数测定结果
• 2.3.6 实验室检查结果
• 2.3.7 特殊检查结果
• 2.3.8 病理学观察
• 2.3.9 超微病理学观察结果
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 3 实验二绵羊肺腺瘤病人工感染病例的临床病理学研究
• 摘要
• 3.1 材料
• 3.1.1 实验动物
• 3.1.2 病毒来源
• 3.1.3 实验试剂、器具及仪器
• 3.2 方法
• 3.2.1 兽医临床基本检查
• 3.2.2 血常规的测定
• 3.2.3 X 线检查
• 3.2.4 病理组织学观察
• 3.2.5 超微病理学观察
• 3.3 结果
• 3.3.1 临床症状检查
• 3.3.2 体温测定结果
• 3.3.3 脉搏测定结果
• 3.3.4 呼吸数测定结果
• 3.3.5 血常规检查结果
• 3.3.6 X 线检查结果
• 3.3.7 病理学观察结果
• 3.3.8 超微病理学观察结果
• 3.4 讨论
• 3.5 小结
• 4 实验三绵羊肺腺瘤病自然感染和人工感染病例的分子病理学研究
• 摘要
• 4.1 材料
• 4.1.1 实验动物
• 4.1.2 试剂
• 4.1.3 仪器
• 4.2 方法
• 4.2.1 PCR 检测方法
• 4.2.2 SPA 自然病例外周血中免疫细胞流式细胞仪检测方法
• 4.2.3 外周血中免疫细胞凋亡的检测
• 4.3 结果
• 4.3.1 SPA 自然病例PCR 检测结果
• 4.3.2 SPA 人工感染病例PCR 检测结果
• 4.3.3 SPA 自然病例外周血免疫细胞的流式细胞仪检测结果
• 4.3.4 SPA 人工感染病例外周血免疫细胞的流式细胞仪检测结果
• 4.3.5 SPA 人工感染病例外周血中免疫细胞凋亡检测结果
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 5 总体结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 作者简介