蛋白激酶C对血小板源性生长因子-B和内皮素-1在糖尿病大鼠视网膜中表达的作用

论文摘要

目的:应用链尿佐菌素（streptozocin,STZ）诱导糖尿病大鼠模型,观察血小板源性生长因子-B（platelet-derived growth factor-B,PDGF-B）和内皮素-1（endothelin,ET-1）在早期糖尿病大鼠视网膜上的表达,并用胰岛素（insulin,INS）和β型蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）抑制剂-LY333531 进行干预治疗,旨在探讨糖尿病视网膜病变早期的发病机制,并为临床用药提供一定的理论依据。方法:选择体重为180220g 雄性SD 大鼠50 只,并随机分为10只正常组用大鼠和40 只建立糖尿病模型用大鼠。采用STZ 诱导糖尿病大鼠模型,确认未用药且血糖<5mmol/l 为对照组（C 组）;多饮,多食,多尿,血糖>16.9mmol/l 为糖尿病大鼠模型。后者平均分为胰岛素组（INS 组）、LY333531 组（LY 组）、和糖尿病组（D 组）。一月后,用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）方法测定各组视网膜中ET-1 以及PDGF-B 在mRNA水平的表达;用蛋白质印迹免疫分析（Western Blot Analysis）方法测定各组视网膜中PDGF-B 在蛋白水平的表达,表达的产物进行半定量琼脂糖凝胶电泳成像分析（agarose gel electrophoresis,AGE）;用直接放射免疫法（radio-immunity,RI）测定各组血浆中ET-1 的浓度。结果:在mRNA 水平上,PDGF-B 和ET-1 的表达在D 组明显高于C 组（P<0.05）, 在D 组PDGF-B、ET-1 的OD 值分别为C 组的1.32倍和1.54 倍;在蛋白水平上,PDGF-B 的表达在D 组明显高于C 组（P<0.05）,比值约为1.55 倍;利用直接放射免疫法测定,D 组与C 组的ET-1 浓度比值约为1.70 倍。INS 组、LY 组与C 组之间的PDGF-B和ET-1 在mRNA 水平上、在蛋白水平上、在直接放射免疫法测定中均无明显差别。结论:（1）一个月时,糖尿病大鼠视网膜内即存在PDGF-B 和ET-1 在mRNA 水平上的增加;（2）一个月时,糖尿病大鼠视网膜内PDGF-B 在蛋白水平上的表达也是增加的;（3）一个月时,糖尿病大鼠外周血中ET-1 的浓度也有明显的升高;（4）胰岛素和特异性PKC-β抑制剂可以抑制PDGF-B 和ET-1 的表达;（5）糖尿病视网膜病变时,PDGF-B 可能促进ET-1 的表达。

论文目录

• 一、论文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• （九） 附图
• 二、文献综述
• （一） 正文
• （二） 参考文献
• 三、致谢