论文摘要
目的:急性白血病（acute leukemia,AL）是血液系统常见的恶性疾病,近年来其发病率有逐年上升的趋势。随着新的化疗药物的不断出现以及造血干细胞移植技术的不断进步,其近期和远期疗效有了明显的提高,但是有些患者在治疗过程中出现原发或者继发的多药耐药（multidrug resistance, MDR）现象,导致化疗失败。MDR指肿瘤一旦对某种化疗药物产生耐药性,就同时对其他结构上无关、作用机理各异的药物也产生交叉耐药性,是一种特殊的广谱耐药现象。耐药细胞株的建立是探讨恶性肿瘤MDR现象的机制及其逆转研究的基础。以往研究中建立耐药细胞株多采用药物低浓度加量持续诱导法,这与临床短疗程、大剂量、反复用药的方式不一致。本研究模拟临床用药特点,采用高浓度反复间歇诱导的方法,建立白血病细胞株K562对VP-16等多药耐药细胞系K562/VP。足叶乙甙（etoposide, VP-16）是半合成的鬼臼毒素衍生物,属于拓扑异构酶II（topoisomerase II, Topo II）毒性抑制剂,主要通过稳定Topo II-DNA断裂复合体,抑制DNA的再连接,造成DNA断裂损伤。VP-16是白血病化疗的常用药物,与阿糖胞苷联合构成的AE方案总有效率可达45%,尤其对于M4和M5效果更佳,MDR现象是其化疗失败的重要因素之一。K562细胞系于1977年建立,遗传背景清楚,生物学性状稳定。经检索国内、外文献,未见由VP-16诱导的K562细胞耐药亚系建立的报道。目前用于研究白血病耐药相关研究的理想模型较少,因此,K562/VP的建立对今后从细胞和分子水平研究白血病多药耐药机制具有较大的实用价值,也为体外筛选化疗药物,研究耐药逆转等提供了必要的实验材料。引起白血病的耐药机制非常复杂,通常有多种因素参与其中。目前已经明确的与耐药有关的机制有:1、具有外排泵作用的膜蛋白表达水平升高,如:细胞膜上的多药耐药蛋白1（multi drug resistance protein 1, mdr-1/ p-170）/P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）多药耐药相关蛋白(multi drug
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