阿魏酸钠对背根神经节神经元P2X3受体介导神经病理痛的作用研究

论文摘要

目的:探讨阿魏酸钠（Sodium ferulate, SF）对大鼠背根神经节神经元P2X3受体介导神经病理痛的作用。方法:建立大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤（Chronic constriction injury, CCI）神经病理痛模型:Ⅰ组为生理盐水对照组;Ⅱ组为假手术组;Ⅲ组为坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）模型组;Ⅳ组为CCI模型+阿魏酸钠处理组;Ⅴ组为阿魏酸钠对照组。（1）通过疼痛行为学观察SF对CCI大鼠机械缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold, MWT）和热缩足反射潜伏期（thermal withdrawal latency, TWL）的影响;（2）应用免疫组织化学方法、原位杂交方法和蛋白印迹方法观察大鼠L4/L5段背根神经节（DRG）P2X3受体的表达变化;（3）应用全细胞膜片钳技术了解阿魏酸钠对背根神经节神经元ATP激活电流的影响。结果:（1）行为学:Ⅲ组较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组相比显示大鼠后足的机械和热痛敏阈值明显降低（p<0.05）,Ⅳ组与Ⅲ组比较大鼠后足的机械和热痛敏阈值升高（p<0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组之间无明显差异。（2）免疫组化、原位杂交和蛋白印迹:Ⅲ组P2X3受体蛋白和P2X3mRNA的表达较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组明显增加,有显著性差异（p<0.05）,Ⅳ组与Ⅲ组比较P2X3受体蛋白表达（p<0.05）和P2X3mRNA表达（p<0.01）明显减少,有显著性差异。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组之间无明显差异。（3）Ⅲ组DRG神经元细胞ATP激活电流与Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组比较明显增强（p<0.05）,Ⅳ组较Ⅲ组ATP激活电流降低（p<0.05）。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组之间无明显差异。结论:神经病理痛大鼠模型背根神经节神经元P2X3受体表达上调。通过整体、细胞及分子水平相结合的实验结果表明,阿魏酸钠对神经病理痛大鼠模型DRG神经元P2X3的表达上调引起的痛觉伤害性信息传递具有抑制作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 主要试剂与液体配制
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 方法
• 2.2.1 实验动物分组及模型制备
• 2.2.2 行为学观察
• 2.2.3 免疫组化
• 2.2.4 原位杂交
• 2.2.5 Western blotting
• 2.2.6 全细胞膜片钳
• 2.2.7 统计方法
• 第3章 结果
• 3.1 模型的鉴定
• 3.2 行为学观察结果
• 3.3 免疫组化结果
• 3.4 原位杂交结果
• 3.5 蛋白印迹（Western-blotting）
• 3.6 全细胞膜片钳结果
• 第4章 讨论
• 3 受体的关系'>4.1 神经病理痛与DRG 神经元P2X₃受体的关系
• 3 受体介导神经病理痛的作用'>4.2 阿魏酸钠对 P2X₃受体介导神经病理痛的作用
• 第5章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果