论文摘要
高尔基体是细胞内一种重要的细胞器,近年来它在细胞生长发育中的作用日益受到关注。本研究欲通过破坏小鼠卵母细胞和小鼠核移植胚胎中的高尔基体,探索高尔基体在二者体外发育进程中的作用。本实验按常规方法对小鼠进行激素处理,收集未成熟卵母细胞,并以小鼠成纤维细胞为供核体,小鼠去核卵母细胞为受体建立核移植重组胚,在膜运输抑制剂BFA(布雷菲德菌素A)的配合使用下,利用高尔基体特异性标记抗体(β-COP)做免疫荧光染色,通过激光扫描共聚焦显微镜拍摄并记录高尔基体的动态变化,同时也研究了小鼠卵母细胞体外培养和小鼠核移植胚胎体外发育的相关影响因素,主要内容及结果如下: (一) 小鼠卵母细胞体外成熟培养 用PMSG对小鼠进行腹腔注射,48h后取未成熟卵母细胞,按实验目的,对其进行体外培养的相关实验和免疫组化实验。结果如下: 1.在DMEM培养液中添加FSH或胰岛素比添加牛血清白蛋白更有利于提高裸卵的体外成熟、体外受精和卵裂效率(P<0.05)。 2.0.5μM的BFA对卵母细胞体外成熟的抑制作用最明显。 3.联合使用10%的乙醇和2mmol/mL的6-DMAP对小鼠裸卵孤雌激