论文题目: 山药糖蛋白的超声辅助提取及免疫调节功能研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 农业生物环境与能源工程
作者: 李金忠
导师: 吴沿友
关键词: 山药糖蛋白,超声辅助提取,纯化,分子量,免疫调节
文献来源: 江苏大学
发表年度: 2005
论文摘要: 糖蛋白是指由寡糖与多肽链共价连接而成的一类结合蛋白质。研究表明,糖蛋白具有调节免疫、抑制肿瘤、降低血糖、血酯、抗氧化、防衰老等作用,在新型特种药物及功能性食品开发方面具有广阔的运用前景。本文主要研究了山药糖蛋白的超声辅助提取、纯化及其免疫调节功能,主要结论总结如下: 1.采用超声辅助提取山药糖蛋白,主要考察了全程超声辅助提取时间、超声作用时间、超声间隙时间、超声功率、提取温度、电机搅拌转速、料液比七个单因素对山药糖蛋白得率的影响。 2.在单因素试验的基础上,选择全程超声辅助提取时间、超声功率、提取温度、料液比4个因素进行了正交试验,并进行了极差分析和方差分析,结果如下: ① 最佳提取条件为全程超声辅助提取时间为40min、超声功率为1400W、提取温度40℃、料液比20g/L。 ② 影响山药糖蛋白得率的主要因素是料液比,其次是全程超声辅助提取时间、超声功率,其中料液比对得率的影响特别显著,全程超声辅助提取时间对得率的影响显著。 ③ 验证了最佳提取条件,结果表明在该条件下提取,糖蛋白得率的平均值为6.847%。 3.对山药糖蛋白用DEAE-52纤维素及SephadexG-75柱层析纯化,得到了一种中性糖蛋白组分GLP-Ⅰ’及一种酸性糖蛋白组分GLP-Ⅱ’;用薄层层析对这两种糖蛋白组分的纯度进行鉴定,结果表明GLP-Ⅰ’及GLP-Ⅱ’的纯度较高;用SephadexG-75柱层析测定了GLP-Ⅰ’及GLP-Ⅱ’的分子量,其分子量分别为89,381Da、47,412Da;薄层层析法测定了GLP-Ⅰ’的单糖组成,结果表明GLP-Ⅰ’的单糖组成主要有:L-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖;对GLP-Ⅰ’进行了红外光谱扫描,其特征吸收峰再次表明该组分为一种糖蛋白。 4.通过碳廓清试验及测定血清溶血素的方法,考察山药糖蛋白对小鼠免疫功能的影响。结果表明,低、高剂量组和对照组之间,小鼠胸腺器官及吞噬指数两项功能检测均为阳性。根据卫生部发布的《保健食品功能学评价程序和检验方法》的结果判定原则,认为山药糖蛋白具有一定的免疫调节功能。
论文目录:
第一章 绪论
1.1 山药的种类、分布及研究开发现状
1.1.1 山药的种类及分布
1.1.2 山药活性成分的提取与分离
1.1.3 山药多糖的药理作用研究
1.1.4 山药产品的开发利用
1.2 植物糖蛋白的研究概况
1.2.1 糖蛋白的类别和分布
1.2.2 糖蛋白的组成和结构
1.2.3 糖蛋白的提取
1.2.4 糖蛋白的纯化
1.2.5 糖蛋白的纯度鉴定
1.2.6 糖蛋白分子量的测定
1.2.7 糖蛋白中糖肽键的鉴定
1.2.8 糖蛋白单糖及氨基酸组成分析
1.2.9 糖蛋白的药理作用及保健功能研究
1.3 本课题研究的意义和主要内容
1.3.1 本课题研究的意义
1.3.2 本课题研究的主要内容
参考文献
第二章 山药糖蛋白检测方法的建立
2.1 前言
2.2 材料、试剂与设备
2.3 苯酚-硫酸法测糖蛋白含量的标准曲线制作
2.3.1 苯酚-硫酸比色法原理
2.3.2 葡萄糖标准溶液的配制
2.3.3 苯酚标准溶液的配制
2.3.4 标准曲线制作
2.3.5 换算因素f的测定
2.3.6 显色稳定性试验
2.3.7 样液中糖蛋白含量的测定方法
2.4 碘显色法测淀粉含量的标准曲线制作
2.4.1 碘显色法测淀粉含量原理
2.4.2 可溶性淀粉标准溶液的配置
2.4.3 标准稀碘溶液的配置
2.4.4 标准曲线制作
2.4.5 样液中淀粉含量的测定方法
2.5 本章小结
参考文献
第三章 山药糖蛋白的超声辅助提取与分离技术的试验研究
3.1 前言
3.2 超声辅助提取的原理
3.2 山药糖蛋白的超声辅助提取
3.2.1 试验材料、试剂与设备
3.2.2 原料的预处理
3.2.3 单因素试验方法
3.2.4 正交试验方法
3.3 山药糖蛋白的分离
3.3.1 试验材料、试剂与设备
3.3.2 游离蛋白质及小分子杂质的去除
3.3.3 山药糖蛋白的乙醇沉淀
3.4 本章小结
参考文献
第四章 山药糖蛋白的纯化工艺研究
4.1 前言
4.2 山药糖蛋白的纯化
4.2.1 材料、试剂和设备
4.2.2 山药糖蛋白的DEAE-52纤维素柱层析
4.2.3 山药糖蛋白的葡聚糖凝胶SephadexG-75柱层析
4.3 山药糖蛋白的纯化定性、纯度鉴定
4.3.1 材料、试剂和设备
4.3.2 山药糖蛋白GLP-Ⅰ’薄层层析定性分析及纯度鉴定
4.3.3 山药糖蛋白GLP-Ⅱ’薄层层析定性分析及纯度鉴定
4.4 山药糖蛋白GLP-Ⅰ’和GLP-Ⅱ’分子量的测定
4.4.1 材料、试剂和设备
4.4.2 分子量测定的试验方法与结果讨论
4.5 山药糖蛋白GLP-Ⅰ’的单糖组成分析
4.5.1 材料、试剂和设备
4.5.2 试验方法与结果讨论
4.6 山药糖蛋白GLP-Ⅰ’的红外光谱分析
4.7 本章小结
参考文献
第五章 山药糖蛋白对小鼠免疫功能的影响
5.1 前言
5.2 碳廓清试验原理
5.3 血清溶血素的测定
5.4 山药糖蛋白对小鼠免疫功能的影响
5.4.1 材料、试剂和设备
5.4.2 试验方法与结果分析
5.5 本章小结
参考文献
第六章 主要结论与进一步的研究工作
6.1 主要结论
6.1.1 分析方法研究
6.1.2 提取方法研究
6.1.3 纯化方法研究
6.1.4 功能特性研究
6.2 进一步的研究工作
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文
发布时间: 2005-10-18
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