葛根素对同型半胱氨酸损伤的血管内皮细胞相关因子影响的实验研究

葛根素对同型半胱氨酸损伤的血管内皮细胞相关因子影响的实验研究

论文摘要

目的: 利用培养人脐静脉内皮细胞株—ECV304,建立同型半胱氨酸(HCY)诱导的细胞损伤模型,探讨葛根的提取物——葛根素对动脉粥样硬化发病过程中血管内皮细胞一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、白介素-8(IL-8)及血管紧张素受体(AT1R、AT2R)mRNA表达的影响,阐明葛根素抗动脉粥样硬化作用的分子基础及作用靶点。 方法: 通过建立HCY诱导的细胞损伤模型,运用生化、放射免疫和反转录聚合酶链式反应等现代实验方法,检测不同浓度葛根素处理的ECV304细胞培养液中NO、ET-1、Ang Ⅱ、IL-8的含量及ECV304AT1R、AT2R的mRNA的表达。 结果: 1.当HCY浓度为10mmol/1时可明显造成ECV304细胞的损伤,表现为内皮细胞分泌NO减少,ET-1、AngⅡ、IL-8增加,AT1R、AT2R的mRNA表达上调。 2.放射免疫方法和化学方法结果显示:HCY明显减少ECV304细胞培养液中血管舒张因子NO含量,增加收缩因子ET-1、AngⅡ和IL-8的含量。E2可明显增加血管舒张因子NO含量,减少收缩因子ET-1及AngⅡ、IL-8的含量。葛根素高剂量组亦可增加血管舒张因子NO含量,减少收缩因子ET-1和AngⅡ、IL-8的含量,但作用弱于E2。 3.RT-PCR结果显示:HCY可使ECV304细胞AT1R、AT2R的mRNA的表达上调,分别较正常细胞升高4.88倍和1.87倍。E2可下调AT1R、AT2R的mRNA的表达,分别比模型组降低了0.46和0.33倍。不同浓度的Pue亦可下调AT1R、AT2R的mRNA的表达,分别比模型组降低了0.33,0.27和0.31,0.30倍。 结论: 1.HCY可使ECV304细胞分泌NO减少,ET-1、AngⅡ和IL-8增加,AT1R、AT2R的mRNA表达上调,从而造成内皮细胞的损伤及内皮细胞功能障碍,加重动脉粥样硬化的发生发展。 2.E2可抑制HCY对ECV304细胞的这种损伤,具有抗动脉粥样硬化作用。 3.葛根素高剂量可通过促进损伤的ECV304细胞NO分泌,减少ET-1、AngⅡ和IL-8释放,发挥抗动脉粥样硬化作用。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩略表
  • 前言
  • 综述:同型半胱氨酸与动脉粥样硬化
  • 实验研究
  • 实验一、血管内皮细胞ECV304损伤模型浓度及给药浓度的筛选
  • 实验二、葛根素对损伤内皮细胞一氧化氮、内皮素-1的影响
  • 实验三、葛根素对损伤内皮细胞血管紧张素Ⅱ、白介素-8的影响
  • 1R、AT2R的mRNA表达的影响'>实验四、RTPCR方法检测葛根素对损伤内皮细胞血管紧张素Ⅱ AT1R、AT2R的mRNA表达的影响
  • 讨论
  • 结语
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 本人研究生阶段主要参与课题及发表论文:
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