论文摘要
目的: 利用培养人脐静脉内皮细胞株—ECV304,建立同型半胱氨酸(HCY)诱导的细胞损伤模型,探讨葛根的提取物——葛根素对动脉粥样硬化发病过程中血管内皮细胞一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、白介素-8(IL-8)及血管紧张素受体(AT1R、AT2R)mRNA表达的影响,阐明葛根素抗动脉粥样硬化作用的分子基础及作用靶点。 方法: 通过建立HCY诱导的细胞损伤模型,运用生化、放射免疫和反转录聚合酶链式反应等现代实验方法,检测不同浓度葛根素处理的ECV304细胞培养液中NO、ET-1、Ang Ⅱ、IL-8的含量及ECV304AT1R、AT2R的mRNA的表达。 结果: 1.当HCY浓度为10mmol/1时可明显造成ECV304细胞的损伤,表现为内皮细胞分泌NO减少,ET-1、AngⅡ、IL-8增加,AT1R、AT2R的mRNA表达上调。 2.放射免疫方法和化学方法结果显示:HCY明显减少ECV304细胞培养液中血管舒张因子NO含量,增加收缩因子ET-1、AngⅡ和IL-8的含量。E2可明显增加血管舒张因子NO含量,减少收缩因子ET-1及AngⅡ、IL-8的含量。葛根素高剂量组亦可增加血管舒张因子NO含量,减少收缩因子ET-1和AngⅡ、IL-8的含量,但作用弱于E2。 3.RT-PCR结果显示:HCY可使ECV304细胞AT1R、AT2R的mRNA的表达上调,分别较正常细胞升高4.88倍和1.87倍。E2可下调AT1R、AT2R的mRNA的表达,分别比模型组降低了0.46和0.33倍。不同浓度的Pue亦可下调AT1R、AT2R的mRNA的表达,分别比模型组降低了0.33,0.27和0.31,0.30倍。 结论: 1.HCY可使ECV304细胞分泌NO减少,ET-1、AngⅡ和IL-8增加,AT1R、AT2R的mRNA表达上调,从而造成内皮细胞的损伤及内皮细胞功能障碍,加重动脉粥样硬化的发生发展。 2.E2可抑制HCY对ECV304细胞的这种损伤,具有抗动脉粥样硬化作用。 3.葛根素高剂量可通过促进损伤的ECV304细胞NO分泌,减少ET-1、AngⅡ和IL-8释放,发挥抗动脉粥样硬化作用。
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