论文摘要
目的有研究证实，噪声、缺血、缺氧、感染、耳毒性药物所引起的感音神经性聋，多伴有直接或间接的神经细胞损伤的病理改变。而这些病理改变与传入神经递质谷氨酸（glutamic acid）在耳蜗中的堆积有关。本文旨在观察低浓度谷氨酸钠（glutamate）对体外培养的耳蜗螺旋神经节细胞（spiral ganglion cells，SGCs）的损伤作用，并初步探讨损伤机制，为感音神经性聋的预防和治疗提供理论依据。方法以出生1天的BALB／C小鼠为研究对象，进行离体SGCs培养，在培养的基础上，应用不同浓度（0、100、200、500、1000μmol／L）的谷氨酸钠干预后，采用DNA ladder及Hoechst33258染色法观察SGCs的凋亡情况，应用半定量RT-PCR方法观察Bcl-2基因的表达情况。应用Image Master VDS3.0软件分析系统进行光密度测定，结果用平均值±标准差（means±SD）表示，差异显著性采用t检验，以P＜0.05作为有统计学显著性差异标准。结果SGCs培养24小时后，大部分呈典型的双极神经元。螺旋神经节活细胞胞体椭圆形或圆形，突起细长，起始部较窄，交织成网状。荧光染色观察，不同浓度Glu处理后的细胞凋亡率分别为13±2.2353（0μmol／L），48.3333±4.2147（100μmol／L），100.3333±9.1352（200μmol／L），179.3333±16.2235（500μmol／L），236.6667±24（1000μmol／L），其中谷氨酸钠浓度在100μmol／L以上的凋亡率与对照组比具有显著差异（P＜0.05），且随着谷氨酸钠浓度的增加，凋亡率增加。此外，随着谷氨酸钠浓度的增加，Bcl-2基因的表达有上升趋势，谷氨酸钠浓度在100μmol／L以上者Bcl-2基因的表达明显上调（P＜0.05）。结论低浓度谷氨酸钠能诱导体外培养的SGCs发生凋亡，这种损伤作用随着谷氨酸钠浓度的增加而逐渐增强；细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达随着谷氨酸钠浓度的增加而增强，表明Bcl-2基因在谷氨酸钠诱导的损伤中起到保护神经元的作用。
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