论文摘要
目的:(1)观察棕榈酸对大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞凋亡的作用。(2)观察牛磺熊脱氧胆酸(TUDCA)对棕榈酸诱导的大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞凋亡的影响。(3)探讨牛磺熊脱氧胆酸阻断棕榈酸诱导大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞凋亡的机制。方法:(1)分别用浓度为0.25mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L的棕榈酸处理培养的大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞12h,以噻唑兰(MTT)法检测细胞毒性作用。(2)用棕榈酸(0.5 mmol/L)加不同浓度的TUDCA(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)培养大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞12h,以噻唑兰(MTT)法检测细胞毒性作用。(3)流式细胞术检测INS-1细胞的凋亡。(4)半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关基因Bax/Bcl-2。结果:(1)棕榈酸处理大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞12h,在0.5-1.0mmol/L的浓度范围内,抑制细胞活性,并能诱导INS-1细胞凋亡(P<0.05)。(2)棕榈酸(0.5mmol/L)加用TUDCA培养大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞12h后,当TUDCA浓度为50-100μmol/L时,与棕榈酸组相比,INS-1细胞活性上升(P<0.05),而细胞凋亡减少(P<0.05)。(3)棕榈酸处理大鼠胰岛素瘤株INS-1细胞12h后,当棕榈酸浓度增加,Bax基因的表达逐渐增高(P<0.05),同时,Bcl-2基因的表达随之降低(P<0.05)。而TUDCA可显著逆转这一现象。结论:TUDCA可通过调节凋亡相关基因Bax/Bcl-2途径保护游离脂肪酸诱导的胰岛β细胞凋亡。
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