角膜内皮细胞与脉络膜色素瘤细胞共培养后细胞生物行为研究

角膜内皮细胞与脉络膜色素瘤细胞共培养后细胞生物行为研究

论文摘要

目的:将角膜内皮细胞(CECs)与人脉络膜色素瘤细胞(OCM-1)共培养后,观察角膜内皮细胞增殖力及细胞周期的变化,观察共培养后细胞形态、中心体及细胞骨架表达情况。方法:体外培养的角膜内皮细胞与人脉络膜色素瘤细胞Transwell体系共培养后,通过流式细胞术检测其细胞周期的变化;通过倒置相差显微镜、HE染色观察内皮细胞生长及形态变化;通过抗中心体γ-tubulin蛋白抗体免疫荧光染色,观察内皮细胞中心体形态及数量;通过抗α-tubulin蛋白抗体免疫荧光染色,观察内皮细胞骨架形态和结构。结果:实验组(CECs与OCM-1共培养)与阳性对照组(CECs与基质细胞共培养)的角膜内皮细胞G1期细胞比例较空白对照组(CECs单独培养)的下降。实验组的角膜内皮细胞S期细胞比例较空白对照组的平均增加近19%,增殖能力显著提高。实验组角膜内皮细胞形态基本规则,呈片状生长,较对照组细胞密度高、增殖旺盛;中心体免疫荧光染色显示,贴近细胞核边缘有清晰的一到两个星形中心体;细胞骨架免疫荧光染色显示结构形态规则、轮廓清晰的细胞骨架。结论:(1)与人脉络膜色素瘤细胞共培养在一定程度上可促进体外培养的猫角膜内皮细胞增殖。(2)体外培养的角膜内皮细胞与人脉络膜色素瘤细胞共培养后细胞形态、中心体表达、细胞骨架形态和结构未见明显异常。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 前言
  • 1.角膜内皮细胞周期研究进展
  • 2.细胞周期的调控
  • 3.本课题研究的目的和意义
  • 4.本课题技术路线
  • 第一章 猫角膜内皮细胞与脉络膜色素瘤细胞共培养其增殖的研究
  • 材料与方法
  • 1.主要实验材料
  • 2.主要实验方法
  • 结果
  • 1.体外培养的猫角膜内皮细胞形态观察
  • 2.流式细胞仪检测结果
  • 讨论
  • 第二章 角膜内皮细胞与脉络膜色素瘤细胞共培养后其生物行为研究
  • 材料与方法
  • 1.主要实验材料
  • 2.主要实验方法
  • 结果
  • 1.活体细胞的生长状况
  • 2.细胞的HE染色
  • 3.细胞中心体免疫荧光染色
  • 4.细胞骨架免疫荧光染色
  • 讨论
  • 附图
  • 参考文献
  • 全文结论
  • 问题与展望
  • 英文缩略词
  • 在读期间发表的文章
  • 致谢
  • 相关论文文献

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