蒜头果组培微繁体系的建立及细胞悬浮培养技术研究

论文摘要

本论文系统地论述了蒜头果的微繁体系和细胞悬浮培养技术，建立了蒜头果微繁体系并优化了蒜头果细胞悬浮培养的培养条件，为蒜头果的人工微繁及利用悬浮培养技术来获取其有效成份的研究提供了参考依据，试验结果如下：1、外植体茎段的最佳灭菌组合是：70％酒精15s+10％NaClO 12min+0.1％HgCl28min；种仁的最佳灭菌组合是：70％酒精30s+12％NaClO 10min+0.1％HgCl230min。2、五种基本培养基（MS、1／2MS、B5、Whiter和Miller）的试验结果表明，MS培养基适宜蒜头果种胚无菌苗的诱导。3、不定芽直接分化途径可作为获取组织培养苗的主要途径。4、GA3能促进芽的继代增殖生长。5、无菌苗下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为：MS+2，4-D1.5mg·L-1+6-BA0.6 mg·L-1+NAA1.0mg·L-1，诱导率达100％。6、蒜头果试管苗较佳的移栽基质是河沙，40d移栽成活率可达86.67％。7、胚乳愈伤组织诱导的最适培养基为：MS+2，4-D2.0 mg·L-1+KT 0.2mg·L-1+6-BA0.4 mg·L-1+GA30.4 mg·L-1，诱导率达100％。8、胚乳愈伤组织增殖的最适培养基为：MS+2，4-D 1.0 mg·L-1+6-BA0.3mg·L-1+GA30.3 mg·L-1，增殖倍数达2.17倍。9、愈伤组织继代增殖分化能力较强的是前2代，增殖倍数都能达2倍以上。10、蒜头果胚乳愈伤组织悬浮培养的最佳条件为：基本培养基为MS，接种量和培养液的比例为6g：200ml，pH6.0，蔗糖为碳源，蔗糖浓度40g·L-1，摇床转速110 r／min。培养20天后，培养液中二十四碳-15-烯酸的含量达2.9g·L-1。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 一、蒜头果的概况
• 二、蒜头果的研究进展
• 三、林木组织培养研究概述
• 四、植物细胞悬浮培养研究进展
• 五、展望
• 六、本研究的目的和意义
• 第一章 材料和方法
• 1.1 试验材料与方法
• 1.1.1 试验材料
• 1.1.2 材料的处理和培养方法
• 1.1.3 观察统计方法
• 1.1.4 二十四碳—15—烯酸测定方法
• 1.1.5 数据分析及统计
• 1.2 组培微繁体系建立的试验方案设计
• 1.2.1 外植体灭菌试验
• 1.2.2 蒜头果种胚无菌苗的诱导及继代试验
• 1.2.3 种胚无菌苗各部位芽的直接诱导试验
• 1.2.4 种胚无菌苗下胚轴愈伤组织的诱导试验
• 1.2.5 种胚无菌苗下胚轴愈伤组织的芽分化试验
• 1.2.6 生根试验
• 1.2.7 移栽试验
• 1.3 悬浮培养体系研究的试验方案设计
• 1.3.1 胚乳愈伤组织的诱导与继代增殖试验
• 1.3.2 胚乳愈伤组织细胞悬浮培养试验
• 第二章 结果与分析
• 2.1 蒜头果组培微繁体系的建立
• 2.1.1 外植体灭菌
• 2.1.2 蒜头果种胚无菌苗诱导与继代的试验结果
• 2.1.3 种胚无菌苗不同部位及实生苗茎段芽的直接诱导
• 2.1.4 不同激素配组对下胚轴愈伤组织诱导的影响
• 2.1.5 不同激素配组对下胚轴愈伤组织芽分化的影响
• 2.1.6 生根试验
• 2.1.7 移栽试验
• 2.2 蒜头果细胞悬浮培养体系研究
• 2.2.1 胚乳愈伤组织的诱导与继代增殖
• 2.2.2 胚乳愈伤组织细胞悬浮培养
• 第三章 讨论
• 3.1 影响蒜头果组培微繁的主要因素
• 3.1.1 材料消毒灭菌
• 3.1.2 基本培养基
• 3.1.3 外源激素
• 3.1.4 种胚无菌苗移栽基质及看护管理
• 3.2 细胞悬浮培养的主要影响因素
• 3.2.1 接种量的影响
• 3.2.2 pH值的影响
• 3.2.3 不同碳源的影响
• 3.2.4 蔗糖浓度的影响
• 3.2.5 摇床转速的影响
• 第四章 结论
• 第五章 有待进一步探讨的问题
• 5.1 芽的直接诱导与增殖
• 5.2 种胚无菌苗下胚轴愈伤组织的芽分化
• 5.3 生根试验
• 5.4 高产细胞系的筛选
• 5.5 悬浮培养条件的优化
• 参考文献
• 图版说明
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文情况