活性氧在细菌脂多糖致畸中的作用

论文摘要

1背景/目的细菌脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）是革兰氏阴性细菌及其它微生物细胞壁中的特有结构,广泛存在于人和动物的消化道内。在严重创伤、肠道感染和饮酒等应激状态下,病灶内细菌释放大量LPS,引起血液LPS浓度迅速升高,诱发内毒素血症。妇女孕期感染诱发自然流产和早产,试验动物孕期接触LPS引起胚胎吸收、早产、宫内胎儿死亡和生长发育迟缓。本课题研究LPS对ICR小鼠的致畸作用,并探讨活性氧（ROS）在LPS致畸中的作用。2方法本研究共有两组实验组成。实验一,孕鼠被随机分为4组。LPS低、中、高剂量组孕鼠分别于受孕第8～12 d每天经腹腔注射相应剂量的LPS （10, 20, 30μg/kg）,对照组经腹腔注射等容量的生理盐水。所有孕鼠于受孕第18 d处死,记录着床数、活胎、死胎和吸收胎数及外观畸形胎仔数,称量活胎体重,测量活胎鼠身长和尾长,评价胎鼠骨骼发育情况。实验二,单纯LPS处理组孕鼠于受孕第8 d经腹腔注射20μg/kg LPS,间隔8 h再次经腹腔给予20μg/kg LPS;LPS+PBN组孕鼠于每次给予LPS前30 min经腹腔注射100 mg/kg自由基捕获剂2-苯叔丁基硝酮（PBN）;对照组经腹腔注射等容量生理盐水或PBN。末次LPS处理后6 h剖杀半数孕鼠,检测母鼠血清和羊水一氧化氮（NO）水平,分析母肝、胎盘和胚胎组织丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量及胎盘组织硝化酪氨酸（NT）残留。其余孕鼠于受孕第18 d剖杀,记录着床数、活胎、死胎和吸收胎数、外观畸形胎仔数,称量活胎体重,测量活胎鼠身长和尾长,评价胎鼠骨骼发育情况。4结果受孕第8～12d连续给予LPS（10～30μg/kg, i.p.）,低剂量（10μg/kg）、中剂量（20μg/kg）和高剂量（30μg/kg）组胎鼠外观畸形率分别为12.5%、34.9%和17.4%,出现畸胎孕鼠百分率分别为41.7%、61.9%和77.8%,LPS中剂量和高剂量组胎鼠外观畸形率和出现畸胎孕鼠百分率均显著高于生理盐水对照组（P<0.01）;LPS引起的外观畸形类型主要为露脑或脑膜膨出。此外,低、中、高剂量组分别有28.9%、77.8%和80.8%的胎鼠出现骨骼畸形。受孕第8 d间隔8 h经腹腔注射给予孕鼠两次相同剂量（20μg/kg）LPS,39.1%胎鼠发生外观畸形,出现畸形胎鼠的孕鼠百分率为76.5%,骨骼畸形发生率达76.6%;自由基清除剂PBN预处理明显抑制母鼠血清和羊水NO含量、对抗LPS引起的母肝和胎盘组织脂质过氧化、减弱胚胎GSH耗损并减少小鼠胎盘硝化酪氨酸残留。进一步研究发现,PBN预处理明显减轻LPS引起的胎鼠外观和骨骼畸形。5结论母鼠孕期接触LPS引起胎鼠外观畸形和骨骼畸形,ROS在LPS致畸中可能发挥重要作用。

论文目录

• 缩写词
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文
• 1. 引言
• 2. 材料和方法
• 2.1 化学试剂
• 2.2 动物的来源与处理
• 2.3 胎仔检查
• 2.4 脂质过氧化分析
• 2.5 谷胱甘肽含量测定
• 2.6 NO 含量检测
• 2.7 硝化酪氨酸（NT）的检测
• 2.8 统计分析
• 3. 结果
• 3.1 长期给予孕鼠不同剂量LPS对胎鼠发育的影响
• 3.2 短期接触LPS 对胎鼠发育的影响
• 4. 讨论
• 5. 小结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述
• 参考文献