蛇毒神经生长因子对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的神经保护研究

蛇毒神经生长因子对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的神经保护研究

论文摘要

目的探讨玻璃体腔内注射蛇毒神经生长因子(viper venom nerve growthfactor, vNGF)对实验性视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia reperfusioninjury, RIR)是否具有神经保护及保护机制。方法采用升高大鼠眼内压的方法, 制作实验性RIR 模型。将Spregue-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组、平衡盐溶液(Balanced SaltSolution, BSS)组及vNGF 组,左眼为手术眼,右眼为自身对照眼。再灌注开始时,BSS 组大鼠玻璃体腔内注入BSS 25μl,vNGF 组注入vNGF 25μl(含100BU),观察再灌注后不同时间段各组大鼠视网膜组织学、超微结构变化和微管相关蛋白1B (microtubule associated proteins 1B, MAP1B)的表达,应用图像分析系统计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)和测量视网膜内层厚度,透射电镜观察视网膜超微结构,应用免疫组织化学法检测MAP1B。结果视网膜缺血再灌注早期,vNGF 组大鼠视网膜水肿较BSS 组轻。BSS组从再灌注2h 开始视网膜内层厚度逐渐变薄,从再灌注6h 开始RGCs 数目逐渐减少。而vNGF 组再灌注24h 后RGCs 数目不进一步减少,48h 后视网膜内层厚度逐渐增加。再灌注后168h,BSS 组大鼠视网膜内层厚度及RGCs 数目明显低于正常组和vNGF 组,差异有明显显著意义(P<0.01);电镜观察BSS组再灌注后24h 出现膜盘排列紊乱、变形,神经纤维层内大量的线粒体肿胀、空泡化和RGCs 核染色质浓缩、边集,出现凋亡小体,胞浆内细胞器空泡化且大量减少。而vNGF 组膜盘排列尚整齐,RGCs 轻度肿胀,胞浆内细胞器较丰富,神经纤维层中的线粒体轻度肿胀,微管结构较清楚。vNGF 组大鼠视网膜超微结构的改变较BSS 组明显轻;免疫组织化学法检测MAP1B 的表达发现,正常组大鼠视网膜中有MAP1B 表达。在BSS 组,再灌注后24h MAP1B的表达逐渐加强,96h 达最强,120h 明显减弱,168h MAP1B 的表达基本与正常组相似。而vNGF 组的MAP1B 的表达于再灌注后6h 就逐渐加强,48h 表达最强,而且染色浓度较BSS 组的96h 的MAP1B 的表达的高峰要强。结论通过向大鼠玻璃体腔内注射vNGF 可以减轻视网膜内层的损伤,并提高MAP1B 的表达而促进神经纤维的再生而对实验性RIR 起保护作用。

论文目录

  • 一、论文
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 材料方法
  • 结果
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 附图
  • 二、致谢
  • 三、综述
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