论文摘要
目的1.研究诃子水提取物对人肺癌A549细胞和肝癌SMMC-7721细胞增殖活性的影响;2.研究诃子水提膜外物对S180腹水瘤小鼠体内抑瘤作用;3.研究诃子水提取物对人肺癌A549细胞和肝癌SMMC-7721细胞及S180腹水瘤细胞抑瘤的量-效范围,旨在探讨诃子水提物抑瘤作用,并寻找最佳量-效范围,为诃子水提取物在肿瘤的治疗方面提供科学的实验依据。方法采用机械研磨透析法制备诃子水提取膜内和膜外物。1.以人肺癌A549细胞和肝癌SMMC-7721细胞株为靶细胞,采用MTT法检测诃子水提膜内和膜外物对癌细胞的增殖活性的影响;用倒置显微镜观察细胞形态学改变。2.取传代接种后7d的S180瘤源小鼠,断椎处死,无菌条件下抽取瘤液,制备细胞悬液,按常规每只鼠腹腔接种0.2ml细胞悬液,制成腹水瘤模型。再随机分为5组,每组10只。分别标记为模型组、CTX组(20mg/ml)、给药组(诃子水提膜外物)分高、中、低3个剂量组。给药组于接种8h后开始灌胃给药治疗,每天早晚各1次,每次1ml;CTX组于接种当天皮下肌肉注射治疗环磷酰胺,给药量为0.2ml/只小鼠,每天给药1次;模型组给予生理盐水灌胃治疗,其它条件同给药组。各组每天定时称量小鼠的体重(g)和腹围(cm),同时观察小鼠腹水的形成、饮食活动、精神状况,记录死亡时间,计算体重比、腹围比和生命延长率。结果(1)诃子不同水提取物均可抑制肺癌A549细胞的增殖,其抑制率与用药的时间和药物浓度有关。10μg/ml的诃子水提膜内物和诃子水提膜外物处理肺癌A549细胞72h后,MTT法检测细胞的抑制率分别为52.25%和86.30%(p<0.01),提示诃子水提膜外物对癌细胞的增殖抑制作用明显高于诃子水提膜内物。(2)诃子水提取物可以抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖,其抑制率与用药的时间和药物浓度有关。其中诃子水提膜内物的增殖抑制率低于诃子水提膜外物(p<0.05);100μg/ml的诃子水提膜内物和诃子水提膜外物处理肝癌SMMC-7721细胞72h后,MTT法检测细胞的抑制率分别为40.85%和84.18%(p<0.01),提示诃子水提膜外物对细胞的抑制作用明显大于诃子水提膜内物。(3) S180腹水瘤细胞体内抑瘤实验显示:模型组存活天数为7.30±1.75,环磷酰胺组存活天数为10.42±3.27,用诃子水提膜外物的低、中、高剂量组存活天数分别为9.15±2.12、10.28±1.46、12.29±1.51,与模型组比较,其生命延长率分别为25.34%、40.82%(p<0.05)、68.35%(p<0.01)。说明中、高剂量的诃子水提膜外物明显延长了S180腹水瘤小鼠的生命。结论诃子水提物可明显抑制肺癌A549细胞和肝癌SMMC-7721细胞的增殖活性,其中诃子水提膜外物作用大于膜内物,肺癌A549细胞对诃子水提物的敏感性高于肝癌SMMC-7721细胞;高剂量诃子水提膜外物可明显延长荷瘤小鼠的生命。
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