论文摘要
目的通过构建幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）胃腺癌上皮细胞SGC-7901 体外感染模型观察Hp 国际标准株NCTC 11637 对SGC-7901细胞生长的影响, 测定感染细胞细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子（CDKI） p27kipl及其mRNA 和黏附分子CD54、CD44s 的表达,以此探讨Hp 感染在胃癌发生、发展中的作用,为胃癌的临床诊断和防治提供理论依据。方法体外培养Hp 国际标准株NCTC11637 和胃腺癌上皮细胞SGC-7901,将六种不同浓度的活菌（3.8×104 ～1.2×108CFU/ml）分别加入胃腺癌上皮细胞建立感染模型,以未加Hp 的细胞为对照,同时对不同浓度Hp 感染细胞和对照细胞进行以下实验:（1）流式细胞仪进行DNA 倍体分析,检测细胞凋亡率和计算增殖指数（PrI）;同时测定黏附分子CD54、CD44s膜蛋白;（2）免疫细胞化学测定PCNA（细胞核增殖抗原）和p27kipl抗原;（3） 细胞原位杂交技术检测细胞p27kipl mRNA;（4） 透射电镜技术观察细胞凋亡,光镜技术观察细胞形态学改变。结果（1）Hp 对胃癌上皮细胞SGC-7901 作用后,低浓度时（≤1.9×105 CFU/ml）,细胞PCNA 表达和增殖指数均增高,而高浓度时（≥4.8×106 CFU/ml）结果相反;（2）流式凋亡结果显示:3.8×104CFU/ml 和1.9×105CFU/ml 感染细胞与对照细胞相比,凋亡率差异无显著性（P>0.05）,而当浓度≥9.6×105CFU/ml 时,随Hp 浓度增加,细胞凋亡率增高,均与对照细胞有显著性差异（P<0.01）;（3）不同浓度Hp 感染的细胞p27kipl 表达均显著低于对照细胞（P<0.05）,呈浓度依赖性,而其mRNA 表达无显著性差异（P>0.05）,与p27kipl蛋白表达不具一致性。同时流式细胞仪检测平均荧光强度结果显示:CD44s、CD54 表达显著升高,且CD54 升高呈浓度依赖性。（4）光镜结果显示:与不同浓度Hp 共同培养后细胞多数体积变小,形态多样,部分细胞核出现固缩,裂解现象,部分可见空泡样病变;（5）电镜结果显示:在不同浓度Hp 作用下上皮细胞均发生细胞毒空泡病变以及细胞
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