带鱼下脚料蛋白水解螯合物制备及生物特性研究

论文摘要

采用复合酶水解带鱼下脚料蛋白产物的离子结合条件及抗氧化活性和抗菌活性,为带鱼高值化加工利用提供新的途径及理论依据。其主要内容为:1、复合酶分别在鱼肉脱脂和不脱脂的情况下,时间对水解度变化的影响;2、研究在不同的水解度、pH、温度、时间的条件对亚铁离子与带鱼酶解产物螯合率的影响;3、对螯合物的结构红外光谱分析;4、初步研究亚铁离子多肽螯合物的抗氧化活性;5、初步研究亚铁离子多肽螯合物的抗菌活性。研究的结果表明:1)确定了复合酶水解脱脂和未脱脂带鱼水解度随时间的变化曲线,脱脂情况下DH达到5%、10%、15%、20%的时间分别是5h、11h、16.5h、24.8h;未脱脂情况下DH达到5%、10%、15%、20%的时间分别是2h、4h、10h、23h;2)在DH=5%,pH为7,温度20℃,时间30min得到亚铁离子最佳螯合率为94.15;3)对螯合产物进行红外光谱分析,可以确定金属离子与多肽螯合,并进一步推测是以单齿共价鍵方式结合;4)以生育酚为对比,亚铁离子螯合物具有良好的抗氧化能力,经过50%乙醇沉淀的螯合铁具有明显的抗氧化活性,其抗氧化作用相当于生育酚的92.35%;5)通过牛津杯双层平板法,将活性肽及亚铁的样品对大肠杆菌,枯草牙孢杆菌,金黄色葡萄球菌,沙门氏菌进行实验,得出螯合反应加80%无水乙醇分级沉淀得到的螯合铁对枯草牙孢杆菌和金黄色葡萄球菌有较好的抗菌效果。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 蛋白质概述
• 1.2 水解蛋白的研究现状
• 1.3 蛋白水解产物的生物活性肽的研究现状
• 1.4 微量元素多肽螯合物研究应用现状
• 1.5 抗氧化活性物质的研究现状
• 1.6 蛋白水解产物及其抗菌活性的研究现状
• 1.6.1 抗菌肽的抗菌机理
• 1.6.2 抗菌肽的应用前景
• 1.7 本课题的立题依据
• 2复合酶水解带鱼蛋白及螯合工艺技术
• 引言
• 2.1 实验
• 2.1.1 主要材料
• 2.1.2 仪器设备
• 2.1.3 实验方法
• 2.1.3.1 常规分析方法
• 2.1.3.2 α-氨基氮的测定
• 2.1.3.3 水解度（DH）测定
• 2.1.3.4 多肽螯合物铁合成工艺
• 2+含量测定（邻二氮菲法）'>2.1.3.5 Fe²⁺含量测定（邻二氮菲法）
• 2.1.3.6 多肽螯合物钙合成工艺
• 2+含量测定（邻二氮菲法）'>2.1.3.7 Ca²⁺含量测定（邻二氮菲法）
• 2.1.3.8 螯合率公式
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 带鱼下脚料的常规成分
• 2.2.2 脂肪对复合酶水解带鱼下脚料水解度的影响
• 2+与带鱼多肽螯合条件的研究'>2.2.3 Fe²⁺与带鱼多肽螯合条件的研究
• 2+螯合反应的影响'>2.2.3.1 水解度对Fe²⁺螯合反应的影响
• 2+螯合反应的影响'>2.2.3.2 不同pH值对Fe²⁺螯合反应的影响
• 2+螯合反应的影响'>2.2.3.3 温度对Fe²⁺螯合反应的影响
• 2+螯合反应的影响'>2.2.3.4 时间对Fe²⁺螯合反应的影响
• 2+与带鱼多肽螯合条件的研究'>2.2.4 Ca²⁺与带鱼多肽螯合条件的研究
• 2+螯合反应的影响'>2.2.4.1 水解度对Ca²⁺螯合反应的影响
• 2+螯合反应的影响'>2.2.4.2 不同pH值对Ca²⁺螯合反应的影响
• 2+螯合反应的影响'>2.2.4.3 温度对Ca²⁺螯合反应的影响
• 2+螯合反应的影响'>2.2.4.4 时间对Ca²⁺螯合反应的影响
• 2.3 本章小结
• 3 带鱼多肽及其亚铁和钙离子螯合物红外光谱分析
• 引言
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 主要材料与试剂
• 3.1.2 主要仪器
• 3.1.3 红外光谱分析方法
• 3.2 结果与讨论
• 2+红外光谱分析'>3.2.1 多肽及多肽-Fe²⁺红外光谱分析
• 2+红外光谱分析'>3.2.2 多肽-Ca²⁺红外光谱分析
• 3.3 本章小结
• 4 初步研究带鱼水解蛋白及其螯合物的抗氧化活性
• 引言
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 仪器与设备
• 4.1.3 实验方法
• 4.1.3.1 粗蛋白测定
• 4.1.3.2 α-氨基氮的测定
• 4.1.3.3 水解度（DH）测定
• 4.1.3.4 抗氧化活性的测定
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 多肽及其与亚铁离子和钙离子螯合物
• 4.2.2 多肽及其亚铁离子螯合物的抗氧化活性研究结果
• 4.2.3 多肽及其钙离子螯合物的抗氧化活性研究结果
• 4.3 本章小结
• 5 初步研究带鱼水解蛋白及其螯合物的抗菌活性
• 引言
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 材料
• 5.1.2 仪器与设备
• 5.1.3 实验方法
• 5.1.3.1 菌种活化
• 5.1.3.2 菌悬液制备
• 5.1.3.3 抗菌能力测定方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 活性肽抑菌活性研究
• 5.2.2 活性肽亚铁离子螯合物抑菌活性研究
• 5.2.3 活性肽钙离子螯合物抑菌活性研究
• 5.3 本章小结
• 6 结论与展望
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 发表的学术论文