论文摘要
研究背景与目的:神经干细胞(neural stem cells,NSC)的发现是神经生物学领域的最大突破。NSC 不仅对中枢神经系统发育成熟后不可能再生的理论提出了挑战,也为神经系统损伤和退行性病变的治疗带来了新的希望。NSC 的分离、培养、纯化、鉴定以及扩增和诱导分化是研究神经系统再生和临床治疗的前提。本课题旨在获得人胚胎 NSC,并通过培养了解其生物学特性,为深入研究其增殖、分化奠定基础。 方法: 1.从人胚胎大脑皮层中分离、培养、纯化原代人胚胎 NSC,经体外反复传代培养以获得能在体外长期生存的 NSC。 2.NSC 的鉴定:①单细胞克隆实验检测其自我更新能力;②免疫细胞化学检测 NSC 特征性标志 nestin 表达;③NSE、GFAP 免疫细胞化学检测其多向分化能力。 3.用细胞计数法检测不同种植密度对 NSC 的增生的影响,研究其生长特点并绘制生长曲线。 4.经体外长期传代培养、扩增和冷冻复苏后观察其增殖能力和生物学特性的稳定性。
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