论文摘要
目的:分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作为结核抗原的特性,并探讨以其作为抗原的酶联免疫斑点实验（ELISPOT）在结核诊断中的应用价值。方法:利用ELISPOT对ESAT-6/CFP-10融合蛋白与PPD作比较,分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作为结核特异性抗原的特性与优势;并通过以ESAT-6/CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT法（ESAT-6/CFP-10-ELISPOT）检测经结核特异性抗原刺激后分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞数量方法,测定65例单纯结核病患者,16例HIV/结核双重感染患者,20例HIV感染患者,32例非结核呼吸道疾病患者,30名健康体检者外周血单个核细胞中结核菌抗原特异的T淋巴细胞的频率。并与传统结核诊断方法进行比较。结果:ESAT-6/CFP-10融合蛋白与PPD在结核患者中抗原作用相同,但是PPD在正常BCG接种人群中会出现假阳性,而融合蛋白仍为阴性。ESAT-6/CFP-10-ELISPOT与TST（PPD皮试）在所有81例结核患者中的比较,ESAT-6/CFP-10-ELISPOT阳性率98.8%,TST阳性率为56.8%,差异有统计学意义;ESAT-6/CFP-10-ELISPOT在涂阳结核组、涂阴结核组（肺外结核）、HIV/结核双重感染组阳性率分别为100%、97.1%、100%,其敏感性远高于痰涂片检查,且各组结果差异无统计学差异。对照组中20例HIV感染组有1例阳性,非结核呼吸道疾病患者组与健康对照组均为阴性,提示ESAT-6/CFP-10-ELISPOT方法的特异度为98.8%。结论:1、ESAT-6/CFP-10融合蛋白与PPD、单一抗原相比,具备更高的敏感性与特异性且不受BCG接种干扰等优势。提示融合蛋白更适合作为结核诊断中的特异性抗原。2、ESAT-6/CFP-10-ELISPOT比传统结核诊断方法更灵敏、特异、快速。3、ESAT-6/CFP-10-ELISPOT对各种类型的结核均有高敏感和高特异性,尤其为以往诊断困难的SNPT、肺外结核、HIV与TB双重感染患者及与其他呼吸系统疾病的鉴别提供了快速、确切诊断的可能。对结核潜伏感染（LTBI）比TST（PPD皮试）更敏感和快速,提示可替代TST对结核进行早期诊断。4、ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的结果判定标准仅以一个界定值作为划分是否感染的指标,斑点具体数目多少的意义仍未知。
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