江油市人民医院四川江油621700
【摘要】目的：探究化学发光免疫分析技术（CLIA）在乙肝病毒血清学检验中的应用效果。方法：选取我院接收的疑为乙型肝炎患者69例，对其先后进行CLIA检测和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测，以实时荧光定量PCR检验结果为参照，比较分析两种检测方式的诊断敏感性、特异性和准确性。结果：CLIA检测的敏感性、特异性和准确性均高于ELISA检测，差异有统计学价值（P＜0.05）。结论：在乙肝病毒血清学检验中采用CLIA检测有利于提高诊断的敏感性、特异性和准确性，值得临床推广。
【关键词】化学发光免疫分析技术；乙肝病毒；血清学检验
前言
乙型肝炎是临床上常见的一种传染性疾病，其能够通过性接触、血液以及破损皮肤等途径传播，如不及早诊出并做出相应的处理，不仅会延误患者的治疗时机，还会对其他人的生活造成困扰[1]。实时荧光定量PCR检验是乙型肝炎诊断的金标准，但其由于检查时间长、费用高等因素，不宜作为首选检查方式[2]。为此，本文以我院收治的69例疑为乙型肝炎患者为研究对象，分析化学发光免疫分析技术（CLIA）检测的应用价值，内容如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
在我院2017年1月～2019年2月期间收诊的疑为乙型肝炎的患者中，抽取69例作为研究对象，患者表现为食欲不振、肝区疼痛、上腹部不适、下肢水肿、全身乏力、恶心、厌油、低热、皮肤黄疸等症状。在本组患者中，男45例，女24例；年龄为42～77岁不等，平均年龄为（61.58±8.35）岁。所有患者均具知情权，且自愿参与本研究。
1.2方法
所有患者均取清晨空腹肘静脉血5mL，然后离心分离血清并装入无菌试管待检。
两步夹心法化学发光免疫分析技术（CLIA）：乙型肝炎表面抗原、抗体、e抗原采用直接夹心化学发光法，将小鼠单克隆抗体或抗原混合物用于包被磁微粒（固相），针对不同抗原或抗体表位的小鼠单克隆抗体或抗原混合物与鲁米诺衍生物连接（异鲁米诺—抗体或抗原结合物），首次孵育时，检测物中的抗原或抗体与固相结合。第二次孵育时，抗原或抗体结合物与结合到固相上的抗体或抗原发生反应，每次孵育后均将未结合的物质洗掉，随后，加入启动试剂，诱导快速化学发光反应，采用光电倍增管对光信号进行检测，以相对发光单位（RLU）表示，与检测物中的抗原或抗体成正比，并使用LIAISON®XL全自动化学发光免疫分析仪进行分析。乙型肝炎e抗体和核心抗体采用的是竞争夹心化学发光免疫分析。
酶联免疫吸附试验（ELISA）：乙型肝炎表面抗原采用双抗体酶联免疫吸附试验原理，首先采用去离子水或蒸馏水对浓缩洗涤液进行20倍稀释，分别设置阴性、阳性对照l微孔板，并对其编号，然后取20µl加入相应的微孔板，将样本加入阴性或阳性对照组，使其均匀混合，使用封板膜封板并在37℃下放置1h，1h后加入50µl酶标试剂并振荡均匀，再次进行封板，并置入37℃水浴箱0.5h，取出封板膜，采用洗板机进行洗涤，扣干之后加入50µl的A、B显色剂，在37℃下避光放置0.5h，最后加入终止液观察检测结果。乙型肝炎表面抗体、e抗体、e抗原采用的是一步法双抗原或抗体夹心法，核心抗体采用的是竞争法。
1.3观察指标
以实时荧光定量PCR检验结果为金标准，统计CLIA和ELISA检测的诊断敏感性、特异性、准确性的相关数据并分析。
在诊断效果上，乙型肝炎为阳性，非乙型肝炎为阴性，敏感性=真阳/（真阳+假阴）×100%；特异性=真阴/（真阴+假阳）×100%；准确性=（真阳+真阴）/总例数×100%。
1.4统计学处理
本研究69例疑为乙型肝炎患者的临床数据输入SPSS18.0处理，诊断敏感性、特异性及准确性均以百分比描述，用x2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。
2.结果
2.1两种检查方式的结果
实时荧光定量PCR检验显示，乙型肝炎48例，非乙型肝炎21例。以此为金标准，CLIA检测显示，乙型肝炎47例，非乙型肝炎22例，其中漏诊2例，误诊1例；ELISA检测显示，乙型肝炎45例，非乙型肝炎24例，其中漏诊10例，误诊7例，详见表1。
2.2两种检查的准确性、敏感性和特异性对比
CLIA检测的敏感性、特异性和准确性均大于ELISA检测，其差异具有显著性（P＜0.05），详见表2。
3.讨论
乙型肝炎是一种常见的病毒性肝炎，发病率较高，且具有感染性，需要及早诊出并隔离治疗，以改善疾病预后。但是，乙型肝炎早期症状不典型，需要采用免疫检测进行确诊，目前有CLIA和ELISA两种方式较为常用，其操作简单[3]，但具体诊断价值仍需进一步探究。在本研究中，对69例疑为乙型肝炎患者先后进行CLIA检测和ELISA检测，其中ELISA检测通过酶标记待测抗原和抗体，根据其底物显色情况进行诊断，其属于间接检测，容易产生误差；而CLIA检测是利用化学发光测定技术和免疫反应技术的一种检测技术，在检查中，突变抗体对抗体不会造成影响，由于其标记物来源丰富，对各种逃逸的变异株局能够识别，有利于降低人为因素对检查结果的干扰，从而提高其检查的准确性。因此，研究结果显示，与ELISA检测相比，CLIA检测的敏感性、特异性和准确性较高，组间差异显著（P＜0.05），说明CLIA检测在乙肝病毒血清学检验中应用价值明显。
综上所述，CLIA检测应用于乙肝病毒血清学检验中效果显著，其诊断准确性、敏感性和特异性较高，可作为乙型肝炎诊断的首选方法之一。
参考文献
[1]黄怿箐.化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的应用分析[J].基层医学论坛,2017,21(23):3102-3103.
[2]辛晓阳,徐立群,潘峰.化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的价值分析[J].中国现代医生,2018,56(10):127-130.
[3]殷蓓琦,黄秋芳.三种不同免疫检测法对乙肝血清学标志物检测的结果对比分析[J].标记免疫分析与临床,2017,24(6):682-685.