“芪苓”制剂多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜免疫及免疫调节作用的影响

论文摘要

150只昆明小鼠随机分为空白对照组、环磷酰胺（Cyclophosphamide,CY）模型组和三个不同剂量多糖组（低剂量+CY组、中剂量+CY组、高剂量+CY组）,每组30只。空白对照组和CY模型组灌服蒸馏水,三个多糖组分别灌服不同剂量（200mg/kg·BW、400mg/kg·BW、600mg/kg·BW）“芪苓”制剂多糖,连续19d,第20d空白对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射CY（100mg/kg·BW）。通过检测肠道微生物菌群、肠黏液分泌型免疫球蛋白A（secretory immunoglobulin A,SIgA）含量,观察肠道组织黏膜形态和相关细胞数量的变化,并检测血清免疫指标（血清免疫球蛋白、补体、血清溶菌酶等）、抗氧化指标以及测定免疫器官指数,重点研究了“芪苓”制剂多糖对CY所致的免疫损伤小鼠肠道黏膜免疫及其免疫调节作用的影响。结果如下:（1）小鼠肠道内容物主要菌群结果显示:与CY模型组比较,三个“芪苓”制剂多糖组双歧杆菌、乳酸菌数量均显著增加,而大肠杆菌、肠球菌数量均显著降低（P<0.05或P<0.01）,表明“芪苓”制剂多糖能拮抗CY导致的肠道菌群紊乱。（2）小鼠肠道肠黏液SIgA含量检测结果显示:CY模型组肠黏液SIgA含量显著降低,不同剂量“芪苓”制剂多糖组小鼠肠黏液SIgA水平均显著提高（P<0.05或P<0.01）,表明“芪苓”制剂多糖在一定程度上能拮抗CY所致的肠道黏膜免疫损伤。（3）小鼠肠道显微镜检结果显示:CY模型组小鼠各肠段肠绒毛缩短,绒毛长度与隐窝深度比值（V/C）下降,上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量减少;与CY模型组比较,“芪苓”制剂多糖组小鼠肠绒毛长度增加,V/C比值变大,上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量增加,表明该多糖能拮抗环磷酰胺对小鼠肠黏膜的免疫损害作用,增强肠道黏膜免疫功能。（4）小鼠血清免疫指标结果显示:CY模型组小鼠血清免疫球蛋白、补体、蛋白含量、溶菌酶含量及其免疫器官指数均显著低于空白对照组（P<0.01）,与CY模型组比较,三个“芪苓”制剂多糖组小鼠上述指标含量均显著升高（P<0.05或P<0.01）,表明“芪苓”制剂多糖能提高小鼠的免疫功能,拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用。（5）小鼠血清SOD的活性和MDA的含量结果显示:与空白对照组相比,三个“芪苓”制剂多糖组血清SOD活性及MDA含量差异极显著（P<0.01）;与CY模型组相比,三个多糖组小鼠血清SOD活性及MDA含量均差异极显著（P<0.01）,提示“芪苓”制剂多糖能提高免疫抑制小鼠的抗氧化能力。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 多糖功能的研究进展
• 1.1 中药多糖对免疫系统的作用
• 1.1.1 中药多糖对免疫器官的促进作用
• 1.1.2 中药多糖对免疫细胞的影响
• 1.1.3 中药多糖对免疫分子的影响
• 1.2 中药多糖的抗肿瘤作用
• 1.3 中药多糖的抗病毒作用
• 1.4 中药多糖的抗氧化作用
• 1.4.1 中药多糖清除活性氧的作用
• 1.4.2 中药多糖对抗氧化酶活性的作用
• 1.4.3 中药多糖对脂质过氧化物代谢的影响
• 1.5 中药多糖对机体胃肠道微生物的影响
• 1.6 中药多糖对动物生长性能的影响
• 2 中药超微粉碎技术
• 2.1 中兽药超微粉碎的特点及应用优势
• 2.2 超微粉碎对多糖溶出的影响
• 3 肠道黏膜免疫
• 3.1 肠黏膜免疫的主效因子——SIgA
• 3.2 肠黏膜免疫细胞
• 3.2.1 诱导免疫细胞
• 3.2.2 效应免疫细胞
• 4 环磷酰胺在动物免疫抑制模型中的运用
• 5 本课题研究的目的、意义
• 第二章 “芪苓”制剂多糖的提取与含量测定
• 1 材料与方法
• 1.1 “芪苓”超微粉制备
• 1.2 主要仪器
• 1.3 方法
• 1.3.1 “芪苓”制剂多糖的提取
• 1.3.2 “芪苓”制剂多糖含量测定
• 2 结果与分析
• 2.1 葡萄糖标准曲线
• 2.2 “芪苓”超微粉粗多糖提取量
• 2.3 “芪苓”超微粉总多糖含量测定
• 3 讨论
• 第三章 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道菌群及分泌型免疫球蛋白A（SIgA）的影响.
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 药品
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 分泌型免疫球蛋白A 试剂
• 1.2 试验动物
• 1.3 主要仪器
• 1.4 方法
• 1.4.1 试验动物分组和给药
• 1.4.2 样品采集与处理
• 1.4.3 小鼠肠黏液样品SIgA 含量的测定
• 1.5 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 各组小鼠肠道菌群的变化
• 2.1.1 菌落形态观察
• 2.1.2 菌量计数
• 2.2 各组小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A 的变化
• 3 讨论
• 3.1 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道菌群的影响
• 3.2 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道SIgA 的影响
• 3.3 肠道菌群与SIgA
• 第四章 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道黏膜结构及相关免疫细胞的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物
• 1.2 试验动物分组和给药
• 1.3 载玻片及盖玻片的处理
• 1.4 染色液和固定液的配置
• 1.4.1 Carnoy’s 固定液
• 1.4.2 Harris 苏木精配制方法
• 1.4.3 1%伊红水溶液的配制
• 1.4.4 1%盐酸酒精的配制
• 1.4.5 阿利新兰醋酸液
• 1.4.6 1%高碘酸液
• 1.4.7 Schiff 试剂的配制步骤
• 1.4 操作步骤和检测指标
• 1.4.1 固定与取材
• 1.4.2 脱水与透明
• 1.4.3 浸蜡
• 1.4.4 包埋
• 1.4.5 切片
• 1.4.6 贴片
• 1.4.7 染色
• 1.5 检测指标与数据处理
• 1.5.1 检测指标
• 1.5.2 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道黏膜形态的影响
• 2.1.1 “芪苓”制剂多糖对小鼠十二指肠绒毛长度、V/C 比值、肌层厚度的影响
• 2.1.2 “芪苓”制剂多糖对小鼠空肠绒毛长度、V/C 比值、肌层厚度的影响
• 2.1.3 “芪苓”制剂多糖对小鼠回肠绒毛长度、V/C 比值、肌层厚度的影响
• 2.2 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道上皮内淋巴细胞数量的影响
• 2.2.1 小鼠肠道上皮内淋巴细胞分布情况
• 2.2.2 小鼠肠道上皮内淋巴细胞数量变化
• 2.3 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道黏液细胞的影响
• 2.3.1 小鼠肠道黏液细胞分布情况
• 2.3.2 小鼠肠道杯状细胞数量变化
• 3 讨论
• 3.1 “芪苓”制剂多糖对小鼠小肠绒毛长度、V/C 比值、肌层厚度的影响
• 3.2 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道上皮内淋巴细胞数量的影响
• 3.3 “芪苓”制剂多糖对小鼠肠道杯状细胞数量的影响
• 第五章 “芪苓”制剂多糖对小鼠非特异性免疫功能的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试剂
• 1.2 试验动物
• 1.3 主要仪器
• 1.4 方法
• 1.4.1 试验动物分组和给药
• 1.4.2 样品采集与处理
• 1.4.3 血清免疫学指标
• 1.4.4 小鼠免疫器官指数
• 1.5 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 试验小鼠血清免疫球蛋白含量测定结果
• 3与C₄ 含量测定结果'>2.2 试验小鼠血清补体 C₃与C₄含量测定结果
• 2.3 试验小鼠血清总蛋白、白蛋白及其球蛋白的含量测定结果
• 2.4 试验小鼠胸腺指数、脾脏指数
• 2.5 试验小鼠血清溶菌酶含量测定结果
• 3 讨论
• 3.1 “芪苓”制剂多糖对小鼠血清免疫球蛋白的影响
• 3.2 “芪苓”制剂多糖对小鼠血清补体的影响
• 3.3 “芪苓”制剂多糖对小鼠血清蛋白的影响
• 3.4 “芪苓”制剂多糖对小鼠免疫器官指数的影响
• 3.5 “芪苓”制剂多糖对小鼠血清溶菌酶的影响
• 第六章“芪苓”制剂多糖对小鼠抗氧化功能的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试剂
• 1.2 试验动物
• 1.3 主要仪器
• 1.4 方法
• 1.4.1 试验动物分组和给药
• 1.4.2 样品采集与处理
• 1.4.3 样品的测定
• 1.5 数据处理
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附录
• 致谢