蚕蛾粘液腺及其分泌物的研究

论文摘要

本试验测定并比较了家蚕散卵限性品种（H-9）,家蚕普通品种（青松×皓月）,柞蚕品种（克青）及柳蚕卵表面胶着物质的含量,对家蚕散卵限性品种（H-9） 、家蚕普通品种（青松×皓月） 、柞蚕、柳蚕等不同品种蚕雌蛾粘液腺的形状与大小进行了对比,试图阐明彼此间产生差异的原因。为了进一步了解粘液腺中胶着物质的理化性质,采用 SDS-PAGE 方法分析鉴定了柞蚕和柳蚕粘液腺胶着物质中的蛋白质组分。并对柞蚕雌蛾粘液腺枝状部横截面进行了切片显微镜观察,以期阐明粘液腺分泌胶着物质的机理并为研究其它生物物种的分泌组织的分泌机理提供参考。此外,为了确定柞蚕雌蛾粘液腺内容物中分子量为 56 kD 蛋白的一级结构,对其进行了纯化以及蛋白质的电泳印迹并尝试测定其蛋白质 N-末端氨基酸残基。结果表明:普通家蚕品种卵表面胶着物质的含量约 0.037 mg/粒,家蚕散卵限性品种的卵表面胶着物质的含量约为 0.022 mg/卵,少于普通家蚕品种。此外还发现家蚕散卵限性品种与普通家蚕品种相比粘液腺有所退化,粘液腺的重量较轻且形状也有所不同,分泌的胶着物质量较少,这可能是二者产生差异的主要原因。而柞蚕和柳蚕卵表面的胶着物质含量约为 1.01mg/粒和 1.1 mg/粒,约是普通家蚕品种卵的 30 倍。就卵的大小和表面积而言,柳蚕比家蚕大的多,与柞蚕相当。柞蚕和柳蚕的粘液腺枝状部呈细长管状结构,而家蚕的枝状部分枝较多,且柞蚕和柳蚕的干状部比家蚕的干状部发达的多。柞蚕的粘液腺干状部长度平均约 1.8 cm,柳蚕的约 2 cm , 而家蚕的粘液腺干状部长度平均约 0.9cm。通过对柞蚕和柳蚕雌蛾粘液腺内容物的 SDS-PAGE 分析,结果表明:柞蚕雌蛾粘液腺分泌的胶着物质经电泳分析后,凝胶中出现了 7 种主要的蛋白质谱带,其分子量分别为 76 kD,72 kD,56 kD,30 kD,26 kD,24 kD,14 kD。柳蚕的也为 7 条谱带,分子量分别为 114 kD,92 kD,78 kD,53 kD,50 kD,23 kD,12 kD。相对而言,家蚕雌蛾粘液腺分泌的胶着物质中含有的蛋白质种类（76 kD,68 kD,52 kD,48 kD,39 kD,26.5 kD,20.2 kD,18 kD,9.9 kD）较多且分子量偏小一些。柞蚕雌蛾粘液腺枝状部横截面显微观察结果显示:粘液腺枝状部横截面呈圆形或近圆形,腺细胞呈圆锥形,放射排列,中部为腺腔,在细胞内可以隐约看到分泌颗粒。而整体的横截面结构比家蚕的大得多。 本实验通过 SDS-PAGE 方法纯化了 56 kD 蛋白质,并采用电

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 绪论
• 1.1 蚕蛾粘液腺的形态结构及发育过程
• 1.2 国内外研究现状
• 1.3 立题依据及研究意义
• 第二章 普通家蚕品种与家蚕散卵限性品种粘液腺及内容物的研究
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.2.1 卵表面胶着物质含量的测定
• 2.2.2 雌蛾粘液腺的摘除及形状观察
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 家蚕品种（青松×皓月）和家蚕散卵限性品种（H-9）卵表面胶着物质含量的测定
• 2.3.2 家蚕散卵限性品种（H-9，5B）和普通家蚕品种（青松×皓月）雌蛾粘液腺形状、大小比较
• 2.3.3 讨论
• 第三章 柞蚕、柳蚕及家蚕雌蛾粘液腺及内容物研究的对比分析
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 柞蚕、柳蚕和家蚕卵表面胶着物质的含量
• 3.3.2 柞蚕、柳蚕和家蚕雌蛾粘液腺形状大小的比较
• 3.4 讨论
• 第四章 柞蚕雌蛾粘液腺枝状部横截面的组织学观察
• 4.1 材料
• 4.2 组织切片的制作方法
• 4.3 结果与分析
• 第五章 柞蚕和柳蚕粘液腺内容物的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 5.1 材料
• 5.2 方法
• 5.2.1 溶液配置
• 5.2.2 凝胶的制备
• 5.2.3 样品的制备
• 5.2.4 电泳
• 5.2.5 染色及脱色
• 5.3 结果与分析
• 第六章 柞蚕雌蛾粘液腺内容物中56kD 蛋白质的纯化及 N-末端氨基酸残基的测定
• 6.1 材料
• 6.2 方法及步骤
• 6.2.1 56kD 蛋白质的纯化
• 6.2.2 蛋白质印迹
• 6.2.3 N-末端氨基酸残基的测定
• 6.3 结果与分析
• 第七章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 在读期间发表的学术论文