PBR信号途径介导窒息后血清诱导人肾小管细胞损伤的作用

论文摘要

目的：研究外周型苯二氮卓受体（PBR）对新生儿窒息后血清导致人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）损伤的保护作用及机制。方法：（1）以HK-2细胞（Human renal proximal tubular cells）为研究对象。（2）以新生儿重度窒息（Apgar评分小于4分）后第一天血清（20%体积分数）作为攻击因素。（3）本实验按双盲、随机、对照处理原则分为四组,即正常对照组（C组）、窒息对照组（AC组）、窒息后激动剂组（AR组）、窒息后拮抗剂组（AP组）。（4）检测指标：在倒置相差显微镜下观察HK-2细胞的形态学改变及生长情况,外周型苯二氮卓受体被特异性激动剂（Ro5-4864）激动后或被特异性拮抗剂（PK11195）阻断后,用免疫组化检测HK-2细胞内caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达情况。（5）统计学处理：所有数值以均数±标准差（x±s）表示,各实验组间进行单因素方差分析,组间进行LSD检验。P＜0.05为差异有显著统计学意义。采用SPSS10.0统计软件完成。结果：（1）倒置相差显微镜下观察HK-2细胞生长状况：正常对照组细胞贴壁良好,透明度大,折光性强,呈扁平的多角形,分裂相多,细胞排列紧密,连接成片,数量多。窒息对照组细胞生长缓慢,细胞数量比正常对照组明显减少,细胞形态发生改变,由典型的扁平多角形细胞变为不规则圆形或椭圆形,折光性减弱,轮廓增强,胞质中常出现空泡,脂滴,颗粒样物质,细胞间空隙加大,连接松散,细胞间可见较多细胞碎片。窒息后激动剂组细胞损伤得到明显改善,细胞贴壁良好,细胞间连接尚可,但未恢复至窒息对照组或正常对照组。而窒息后拮抗剂组细胞损伤较窒息对照组更重,细胞生长缓慢,细胞数量少,细胞间连接更松散,可见更多细胞碎片。（2）Caspase-9及Bax的表达。与正常对照组（分别为32.11±5.12,23.55±3.86）相比,窒息对照组Caspase-9（63.58±3.80）、Bax（53.23±2.89）表达明显增加。而与窒息对照组相比,窒息后激动剂组Caspase-9（48.59±5.91）、Bax（41.52±3.65）表达明显减少；但窒息后拮抗剂组Caspase-9（75.34±4.83）、Bax （60.28±2.97）表达明显增加,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（3） Bcl-2的表达。与正常对照组（70.36+6.02）相比,窒息对照组（46.29±4.98）表达明显减少；而与窒息对照组相比,窒息后激动剂组（60.45±5.26）表达明显增加；但窒息后拮抗剂组（28.37±4.05）表达明显减少,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：外周型苯二氮卓受体（PBR）的特异性激动剂R05-4864具有减轻窒息后血清对HK-2的损伤的作用,而其特异性拮抗剂PK11195则可加重窒息后血清所致HK-2细胞损伤。其途径可能通过抑制或增强PBR表达活性发生。

论文目录

• 1 PBR信号途径介导窒息后血清诱导人肾小管细胞损伤的作用
• 1.1 中文摘要
• 1.2 英文摘要
• 1.3 前言
• 1.4 材料与方法
• 1.5 结果
• 1.6 讨论
• 1.7 结论
• 1.8 参考文献
• 1.9 英汉缩略词对照表
• 1.10 附图
• 2 致谢
• 3 外周型苯二氮卓受体与细胞损伤（文献综述）