论文摘要
目前禾本科植物内生真菌的研究主要集中在早熟禾亚科Pooideae中的麦角菌科Clavicipitaceae的Neotyphodium属内生真菌和Epichlo（e|¨）属内生真菌,它们统称为epichlo（e|¨）endophytes。至今Neotyphodium属真菌中有17个种得到了公认。2006年3-7月从上海、江苏、安徽和山西等省市,采集鹅观草、早熟禾、黑麦草、羊茅、雀麦和拂子茅等冷季型禾本科植物共计1487株。内生真菌的总检出率为54.3%,江苏省和山西省禾本科植物的检出率分别高达55.5%和69.0%,说明epichlo（e|¨）内生真菌在我国分布广泛,资源丰富。在植物体内,内生真菌系统分布于叶片、叶鞘、茎秆和种子等地上部分的组织器官中,在根中没有发现菌丝体。在叶鞘和茎中菌丝体约2μm宽,细长,单行,粗细均匀,有隔膜,很少分叉,微带弯曲,平行于细胞长轴排列在细胞间隙;在种子中,菌丝体分布在糊粉层细胞之间,菌丝粗细均匀,弯曲度较大。2006年到2007年,采集鹅观草属植物1126株,内生真菌检出率高达55.5%。2001年到2007年积累的来自我国16省市的鹅观草属植物样品中都发现含有Neotyphodium属真菌,并分离到约80株菌。6株鹅观草属植物（4省）中的Neotyphodium属真菌菌株的形态学特征为:在PDA平板上,菌落正面白色,棉质,背面浅褐色至深褐色,生长速度为18.3-48.7mm/21d。分生孢子卵圆形或肾形,单个顶生,4.8-5.9μm×2.1-3.4μm。分生孢子梗呈瓶梗状,垂直于菌丝,单生,通常基部或近基部有隔膜,16.1-24.2×1.8-2.5μm。Neotyphodium-Roegneria共生体组合在我国分布比较广,资源丰富,具有形态多样性和地理多样性,其分类地位的确定需要结合系统发育学分析进一步研究。确认无子座鹅观草属植物中内生真菌是Epichlo（e|¨） yangzii。将23株无子座鹅观草属植物中的epichlo（e|¨）内生真菌的孢子分别与不同交配型的E.yangzii的子座杂交,其中发现有2株与E.yangzii（mat-1）杂交相容,21株与E.yangzii（mat-1,mat-2）杂交不相容。这说明无子座鹅观草属植物的epichlo（e|¨）内生真菌并不都是Neotyphodium属真菌,其中可能有E.yangzii,这也说明人工杂交是区别Neotyphodium属真菌和偶尔不产子座的E.yangzii的有效手段。将我国无子座鹅观草中的内生真菌菌株的tubB和tefA基因序列片段进行了PCR检测、克隆测序和系统发育学分析。首先用8株菌的tubB基因序列构建Epichlo（e|¨）真菌系统发育树,保证分离菌株中不存在E.yangzii的混杂并且证明杂交试验的可信性。然后将我国的6个Neotyphodium菌株进行系统发育学分析,结果表明6株菌的tubB和tefA基因分别有两个拷贝,tubB的第一拷贝约704bp中有6bp不同,tefA的第一拷贝710bp中有8bp不同。Rxy6106,Rxy6107的tubB和Rdy4302的tefA都存在2个拷贝。在基于tubB和tefA的系统发育树上,这6株菌的第一拷贝形成独立的一枝,自展值87,与E.yangzii聚类;Rxy6106,Rxy6107的tubB和Rdy4302的tefA的第二拷贝与E.sylvatica聚类,自展值分别为91和83。我国的Neotyphodium属真菌是一个新的分类群,且可能是由E.yangzii和ETC中的E.sylvatica的杂交而来的。最后,根据分离菌株宿主植物特异性及地理分布、分离菌株形态学特征、杂交试验和系统发育学信息,本研究以我国鹅观草属植物（Roegneria spp.）中的Neotyphodium属真菌为模式菌株,建立了Neotyphodium属的一个新种,命名为Neotyphodium sinicaZ.W.Wang,Y.L.Ji et Y.Kang,sp.nov.。这是我国本土发现的Neotyphodium属的第二个新种,也是亚洲发现的第二个新种。