过氧化氢(H2O2)对小鼠1—细胞期胚胎体外发育的影响

过氧化氢(H2O2)对小鼠1—细胞期胚胎体外发育的影响

论文摘要

为了弄清楚哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的机制,人们不断地从胚胎内部以及外界环境中寻找原因。目前已经发现,损伤的细胞中含有较多的各类氧化物,包括过氧化氢以及其它自由基(例如过氧化物阴离子和氢氧根离子);在因细胞分裂阻断以及细胞功能丧失所引起的异常细胞中也含有这些活性氧类物质。本实验通过研究活性氧(reactive oxygen species, ROS)—过氧化氢(H2O2)对小鼠1-细胞期胚胎体外发育的影响,探讨小鼠早期胚胎体外发育阻滞的原因,为提高哺乳动物早期胚胎体外发育效率,提供可靠的理论依据。 从超数排卵处理的小鼠输卵管中收集1-细胞期胚胎并在体外进行培养,在胚胎发育不同阶段以不同方法添加外源性氧化剂—H2O2的方法研究外源性H2O2对小鼠1-细胞期胚胎体外发育的影响。 实验结果表明,(1) 对照组和含H2O2浓度分别为1.5μMol/L组、1.8μMol/L组的囊胚发育率显著高于2.1μMol/L组、2.4μMol/L组、2.6μMol/L组(P<0.05);(2)添加外源性H2O2(2.1μMol/L)的0~12h处理组和0~72h处理组的囊胚发育率显著低于对照组和其它处理组(P<0.05),而对照组、12~24h处理组、24~36h处理组、36~48h处理组、48~60h处理组、60~72h处理组、之间均差异不显著;(3) 不添加外源性H2O2(2.1μMol/L)的0~12h处理组和对照组的囊胚发育率显著高于对照组和其它处理组(P<0.05),而12~24h处理组、24~36h处理组、36~48h处理组、48~60h处理组、60~72h处理组、0~72h处理组之间均差异不显著。 通过比较分析活性氧(如,H2O2)可以抑制小鼠1-细胞期胚胎的体外发育,而这一抑制作用在胚胎体外发育阻滞阶段更为明显,说明活性氧是诱发哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的重要原因之一。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 一、早期胚胎发育阻滞
  • 二、活性氧对胚胎体外发育的影响
  • 材料与方法
  • 1 试验材料
  • 1.1 时间和地点
  • 1.2 供试小鼠
  • 1.3 主要药品
  • 1.4 主要仪器
  • 2. 试验方法
  • 2.1 药品的配制
  • 2.2 培养液的配制
  • 2.3 小鼠胚胎的收集
  • 2.4 胚胎的液滴培养
  • 2.5 培养条件
  • 3. 试验内容
  • 4. 统计处理方法
  • 结果与分析
  • 1. 昆明母鼠超数排卵的结果
  • 2. 不同浓度的外源性过氧化氢对小鼠1-细胞期胚胎体外发育的影响
  • 3. 不同发育阶段添加外源性过氧化氢(2.1μMol/L)对小鼠1-细胞期胚胎体外发育的影响。
  • 4. 2.1μMol/LH2O2培养条件下在不同发育段停止处理对小鼠1—期胚胎体外发育的影响
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
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