南海珊瑚礁样品中菌株分离及其活性代谢产物研究

论文摘要

海洋具有着陆地无法比拟的优越性,首先其占地球总面积的70%以上,有着辽阔的表面积,为各种生物的生存提供了广阔的空间。其次海洋还具有着生态环境多样性的特点,具有低温、高温、高压、高盐、光照、黑暗、营养贫瘠或富积等特殊生境。再次,因为人类深入开展对海洋生物研究的时间相对较短,许多方面还有待发展,这就为对海洋生物的研究提供了很大的研究空间。南海作为中国四大海域中靠近赤道的海域,其与热带的雨林相似,具有着比其他海域更加丰富的物种和多样性的生态环境。本文以采自南海海域的珊瑚礁为样品,通过对样品中微生物的分离纯化,得到放线菌、真菌等菌株。再通过相关的筛选机制,筛选出具有活性次级代谢产物的菌株,然后对其进行大规模发酵,利用活性追踪的方法,如海虾毒理实验、抑菌实验、HPLC检测等,经过分离纯化等手段的运用,分离出其中的活性成分,再对其进行结构鉴定,最后将有研究价值的菌株进行分子生物学鉴定,确定其种属。本研究利用二十种差异性较大的培养基,从四个珊瑚礁样品中分离出67株放线菌,7株真菌。通过活性筛选、产物HPLC检测对比分析等,最终选取了其中两株放线菌,一株真菌进行了进一步研究。经过对菌株进行培养基等培养条件的筛选优化、活性物质追踪、大型发酵生产、硅胶柱层析、HPLC制备等方法的运用,从中得到了一些化合物单体,经1H,13CNMR波谱数据分析等,确定其中一个单体为利迪链霉素。最后对其中用于大型发酵的两株放线菌和所分离菌株中表型较特殊、具有代表性的几株放线菌进行了分子生物学鉴定,确定其为链霉菌属和诺卡氏菌属的放线菌。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 中文文摘
• 目录
• 绪论
• 1 海洋微生物资源的研究状况
• 1.1 海洋微生物研究的背景
• 1.2 海洋微生物研究的价值
• 1.3 海洋微生物研究的前景
• 2 海洋珊瑚礁研究的进展
• 3 南海海域珊瑚礁微生物的研究
• 3.1 南海海域的简介
• 3.2 南海海域微生物资源的研究
• 3.3 南海海域珊瑚礁微生物资源的研究
• 4 本课题研究的内容与意义
• 4.1 课题研究的内容
• 4.2 课题研究的目的和意义
• 第一章 南海海洋珊瑚礁样品菌株分离
• 1.1 材料与方法
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 方法
• 1.2 结果与分析
• 1.2.1 第一次分离
• 1.2.2 第二次分离
• 1.2.3 讨论
• 第二章 菌株的活性筛选
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果和分析
• 2.2.1 仰菌试验和海虾毒理试验
• 2.2.2 HPLC分析结果
• 2.2.3 分析
• 2.2.4 讨论
• 第三章 菌株的代谢产物研究
• 3.1 菌株KXE0201代谢产物研究
• 3.1.1 材料与方法
• 3.1.2 结果与讨论
• 3.2 菌株XD1301代谢产物研究
• 3.2.1 材料与方法
• 3.2.2 结果与讨论
• 3.3 菌株KXA0301代谢产物的研究
• 3.3.1 材料与方法
• 3.3.2 结果与讨论
• 第四章 菌株的分子生物学鉴定
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果与分析
• 第五章 结论
• 参考文献
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
• 1.科研任务
• 2.已发表或接收的论文
• 致谢
• 个人简历