甘薯叶中多酚提纯工艺及抗氧化活性研究

论文摘要

目前有关甘薯营养价值的研究较多,但对甘薯茎叶研究却远不及对甘薯的研究。甘薯叶能够作为中药治疗多种疾病,说明它富含生物活性成分。甘薯叶资源十分丰富,若能变废为宝,将甘薯叶进行深加工,具有十分重要的经济价值和现实意义。本研究确定了甘薯叶多酚的最优提取工艺参数;从116个国产栽培品种甘薯叶中筛选出多酚含量高且抗氧化活性强的优良品种一莆薯53,评价了其粗提物和各分部萃取物的多酚含量及体外抗氧化活性;研究了大孔吸附树脂初步分离纯化甘薯叶多酚的最优条件,并利用HPLC和LC-MS技术对甘薯叶多酚的具体组成进行了分析,结果如下:通过单因素试验研究了提取温度、乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数等因素对甘薯叶多酚提取得率的影响,进一步通过L9（34）正交试验,得到甘薯叶多酚的最佳提取工艺:提取温度80℃,乙醇浓度70%,料液比1:25,提取时间40 min,提取2次。利用Folin-Ciocalteu法测定116个国产栽培品种甘薯叶的多酚含量,结果表明,甘薯叶多酚含量品种间差异显著,品种间总酚含量相差1.22～3.02倍。以多酚含量较高的8种甘薯叶为实验材料,采用DPPH法、TEAC法、FRAP法、还原力的测定和羟基自由基的清除能力的测定等5种方法测定各甘薯叶乙醇粗提物的体外抗氧化活性,分别分析各体外抗氧化活性与多酚之间的相关性,结果表明甘薯叶体外抗氧化活性与多酚含量存在显著的相关性（R2＞0.7728）,多酚类化合物是甘薯叶乙醇粗提物抗氧化活性的主要功能成分。8种甘薯叶中,莆薯53叶既具有较高的多酚含量又具有较强的抗氧化能力。以莆薯53叶为实验材料,利用Folin-Ciocalteu法、DPPH法、TEAC法和FRAP法分别测定其乙醇粗提物及各分部萃取物的多酚含量及抗氧化能力,结果表明:甘薯叶乙醇粗提物及各萃取物多酚含量均比较丰富,且具有一定的自由基清除能力和还原Fe3+的能力。各分部萃取物中,乙酸乙酯萃取物在多酚含量及抗氧化能力测定中均表现出极大的优越性。从8种大孔树脂中筛选出HP20大孔吸附树脂,研究其初步纯化甘薯叶多酚的适宜条件。结果表明:HP20大孔吸附树脂纯化甘薯叶多酚的最佳吸附和解吸条件为上样液浓度1.2 mg/ml左右、上样液pH4、上样流速2 ml/min,重复过柱1次,最佳洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量约为4倍的柱体积。甘薯叶多酚纯度由11.46%提高到42.29%,得率79.27%。采用HPLC和LC-MS联用技术对甘薯叶多酚进行分析,结果表明,甘薯叶多酚主要为绿原酸及其衍生物,主要为CHA、3,4-diCQA、3,5-diCQA和4,5-diCQA。不同品种的甘薯叶多酚含量上有所差异,但多酚组成基本相同。莆薯53叶乙醇粗提物经HP20大孔树脂初步纯化后,纯度显著提高,多酚含量达到32.92%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 甘薯叶简介
• 1.1 甘薯叶的营养成分组成
• 1.2 甘薯叶的生物活性物质组成
• 1.3 甘薯叶提取物的医疗与保健作用
• 2 多酚类化合物研究进展
• 2.1 植物多酚的研究进展
• 2.2 甘薯叶多酚研究进展
• 3 抗氧化作用的研究
• 3.1 自由基学说
• 3.2 自由基的产生及对机体生命活动的影响
• 3.3 抗氧化剂（自由基清除剂）
• 3.4 抗氧化剂抗氧化能力的评价方法
• 4 大孔吸附树脂的应用研究进展
• 4.1 大孔吸附树脂的应用
• 4.2 影响大孔吸附树脂纯化天然产物的因素
• 5 立题依据、意义及主要研究内容
• 5.1 立题依据和意义
• 5.2 本研究的主要内容
• 第二章 甘薯叶多酚的提取工艺研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 单因素试验结果
• 2.2 正交试验结果
• 3 本章结论
• 第三章 甘薯叶多酚含量测定及抗氧化活性评价
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 优良品种甘薯叶的筛选结果
• 2.2 莆薯53叶乙醇粗提物各萃取层组分得率和多酚含量测定
• 2.3 莆薯53叶乙醇粗提物和各萃取层组分的抗氧化能力分析
• 2.4 相关性分析
• 3 本章结论
• 第四章 甘薯叶多酚的分离纯化及组成分析
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 大孔树脂分离纯化甘薯叶多酚的研究
• 2.2 甘薯叶多酚的组成分析
• 3 本章结论
• 全文结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文
• 致谢