柠条锦鸡儿组织培养关键技术的研究

柠条锦鸡儿组织培养关键技术的研究

论文摘要

柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii),属豆科(leguminasae)锦鸡儿属(Caragana)多年生落叶灌木,是一种抗寒、耐旱、耐盐碱、耐贫瘠,适应性很强的防风固沙树种。本研究以柠条锦鸡儿的茎段为外殖体,通过随机区组设计,结合方差分析等,着重研究了柠条锦鸡儿茎段培养的最佳培养基配方及培养程序,以及影响快速繁殖的关键性因素,初步建立了一套较为完整的快速繁殖体系。主要的研究结果如下:1、对柠条锦鸡儿木质化枝条、当年萌发新枝以及实生苗为外殖体进行消毒处理,综合来看,以采取当年生春季枝条为外殖体是最佳选择。木质化枝条最佳消毒时间:75%酒精20s+0.1%升汞10min,萌发率为72.4%,污染率可控制在6.9%;春季新生枝条最佳消毒时间:75%酒精10s +0.1%升汞10min,萌发率为81.5%,污染率为20.6%;实生苗茎段最佳消毒时间:75%酒精3s+0.1%升汞5min,萌发率72.7%,污染率为35.3%,伤害率为18.2%。2、外殖体取材季节以5月上旬最佳,此时取材污染率、死亡率低,萌发效果好。3、在木质化枝条、春季嫩枝、实生苗、成熟种子以及胚这5种外殖体中,材料褐化程度大小的顺序依次为:种子>木质化枝条>春季嫩枝>实生苗>胚。说明选择胚或实生苗为外殖体接种时可有效降低褐化的发生。4、在初代培养中,培养基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L+AC0.3g/L有利于柠条锦鸡儿的生长,30d后,平均启动率为76.3%。5、继代增殖的最适培养基为MS+6-BA0.2mg/L+IAA0.2mg/L+AC0.4g/L,30d后其平均增殖系数可达83.2%。6、在愈伤组织诱导中,不同外殖体诱导愈伤组织容易度依次为:叶片>春季枝条茎段>无菌苗茎段。在B5 +6-BA 0.5mg/L + 2, 4-D1.5mg/L的培养基中叶片愈伤组织诱导率高达100%。7、愈伤组织分化为芽时,MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L培养基、不采用暗处理的培养效果最好,分化率达到7.6%。8、在生根培养中:采用培养基1/8MS+IBA0.3mg/L+NAA0.8mg/L+蔗糖15g/L生根效果最好。60d后,生根率可达到100%;1/2MS+IBA1.0mg/L +NAA0.5mg/L +蔗糖15 g/L其平均生根条数最多,达6.3条;1/2MS+IBA0.3mg/L +NAA0.3mg/L +蔗糖20g/L有利于根的生长,平均根长为7.7cm。9、炼苗移栽时:基质以腐殖土﹕河沙(1﹕1)效果最好,小苗成活率达87.5%,其次为珍珠岩﹕蛭石(1﹕1)成活率为81.8%,河沙效果最差,成活率仅达58.3%。

论文目录

  • 中文摘要
  • Summary
  • 前言
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 柠条锦鸡儿生物学特性及地理分布
  • 1.1.1 生物学特性
  • 1.1.2 地理分布
  • 1.1.3 柠条锦鸡儿用途
  • 1.2 柠条锦鸡儿的繁殖方式与组培现状
  • 1.2.1 播种繁殖
  • 1.2.2 无性繁殖
  • 1.3 植物组织培养的发展简史及应用
  • 1.3.1 植物组织培养的发展简史
  • 1.3.2 植物组织培养在林业生产中的应用
  • 1.3.3 柠条锦鸡儿的组织培养现状
  • 1.4 研究目的、内容及意义
  • 第二章 试验材料和方法
  • 2.1 试验材料与仪器
  • 2.1.1 试验材料
  • 2.1.2 仪器设备
  • 2.2 基本培养基和药剂
  • 2.2.1 基本培养基
  • 2.2.2 激素的配制
  • 2.3 试验设计
  • 2.3.1 培养基选择
  • 2.3.2 培养条件
  • 2.4 试验方法
  • 2.4.1 柠条锦鸡儿外殖体的选择和污染的控制
  • 2.4.2 初代培养
  • 2.4.3 继代培养
  • 2.4.4 愈伤组织诱导和分化
  • 2.4.5 生根培养
  • 2.4.6 炼苗移栽
  • 2.5 试验结果评价指标
  • 2.5.1 初代培养
  • 2.5.2 继代、壮苗培养
  • 2.5.3 愈伤组织诱导及分化
  • 2.5.4 生根培养
  • 2.5.5 炼苗移栽
  • 2.6 数据的收集
  • 2.6.1 外殖体消毒效果
  • 2.6.2 启动培养与继代培养效果
  • 2.6.3 愈伤组织诱导及分化效果
  • 2.6.4 生根培养效果
  • 2.7 数据统计分析方法
  • 第三章 结果与分析
  • 3.1 初代培养
  • 3.1.1 不同外殖体材料消毒处理与比较
  • 3.1.2 不同取材时期对外殖体生长的影响
  • 3.1.3 不同接种材料对污染和褐化的影响
  • 3.1.4 不同激素配比对初代培养的影响
  • 3.2 继代培养
  • 3.3 愈伤组织的诱导和分化
  • 3.3.1 不同激素对愈伤组织诱导影响的初步选择
  • 3.3.2 外殖体部位对愈伤组织诱导的影响
  • 3.3.3 无菌苗叶片愈伤组织诱导
  • 3.3.4 不同浓度激素对愈伤组织芽分化的影响
  • 3.4 生根培养
  • 3.4.1 不同激素种类对生根效果的初步比较
  • 3.4.2 不同激素浓度组合对生根率的影响
  • 3.4.3 不同激素浓度组合对根数、根长的影响
  • 3.5 炼苗移栽
  • 第四章 结论与讨论
  • 4.1 结论
  • 4.2 讨论
  • 4.2.1 外殖体选择
  • 4.2.2 污染控制
  • 4.2.3 外殖体褐化
  • 4.2.4 玻璃化防止
  • 4.2.5 培养基选择
  • 4.2.6 愈伤组织诱导与分化
  • 柠条锦鸡儿组织培养再生系统操作流程
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附图
  • 作者简介
  • 导师简介
  • 相关论文文献

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