蜂胶提取物的体外抑菌和安全性评价的初步研究

论文摘要

国内外研究发现蜂胶具有广泛的药理作用,被称为“紫色黄金”。它可以明显的提高机体的免疫功能、具有抗癌、调节血糖、抗菌,抑制病毒等效应。目前主要用于保健和预防方面。本文对蜂胶提取物和蜂胶注射液的毒理学作用和体外抑菌作用做了初步研究,为蜂胶在兽医临床上应用提供理论基础。1.冷浸法提取蜂胶和总黄酮含量的测定去除蜂胶中的杂质,提取蜂胶,得到蜂胶提取物,并测定蜂胶提取物中总黄酮的含量。用70%的乙醇超声辅助提取蜂胶,固液比1：5,超声15 min,用真空干燥箱干燥提取物至恒重；用紫外分光光度计在415 nm处测定吸光值,试验结果显示：蜂胶提取率为64.33%,总黄酮含量为18.4%。本提取方法简单,经济,测定方法简单,方便,适合测定总黄酮含量。2.蜂胶提取物的体外抑菌效果测定蜂胶提取物的体外抑菌效果。我们采用滤纸片法,通过测定抑菌直径来测定蜂胶提取物对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,波氏杆菌的抑制作用。结果显示：金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌对蜂胶提取物的敏感度为中度敏感,大肠杆菌,波氏杆菌的敏感度为低度敏感。说明蜂胶提取物有一定的抑菌效果。3.蜂胶提取物的安全性评价3.1蜂胶提取物的一般毒性研究测定蜂胶提取物的急性毒性和亚慢性毒性。用最大耐受法测定了蜂胶提取物的LD50；连续30d灌胃给药蜂胶提取物观察大鼠的亚慢性毒性反应。结果显示蜂胶提取物的LD50>5000 mg/kg,属于实际无毒级；亚慢性试验中,结果显示：体重增长和日龄呈正常上升趋势,各剂量组脏器系数与阴性对照组比较差异均不显著(P>0.05),血液学和血液生化学检查显示虽然有的指标和对照组比较存在一定的差异,但都在正常范围之内,没有统计学意义。病理组织学检查高剂量组没有明显病变和坏死现象,仅有肾脏出现轻微充血现象。说明蜂胶提取物对大鼠没有亚慢性毒性。3.2蜂胶提取物的特殊毒性研究观察蜂胶提取物对小鼠微核的形成和精子的形态的影响,评价其致突变毒性。精子畸形采用连续5d经口给药,在第一天给药35天后处死小鼠,制片观察精子畸形形态；骨髓微核试验采用2次给药法,间隔24h,在第二次给药6h后,处死小鼠制片,观察微核的形成。结果显示小鼠的微核试验和精子畸形试验结果均呈阴性。说明蜂胶提取物对小鼠无致突变作用。3.3蜂胶注射液的肌肉刺激和溶血试验观察蜂胶注射液的肌肉刺激作用和溶血作用,评价其临床应用的安全性。肌肉刺激试验采用给药48h后,处死实验兔,观察股四头肌的反应级数,给药部位的肌肉做病理切片观察；溶血试验采用体内溶血的方法,测定给药前后尿胆原吸收值的变化和血常规的检查来判定体内溶血现象。结果显示,肌肉刺激试验中,仅见给药部位有轻微充血现象,反应级数总和为4级,病理切片显示给药组肌肉没有发生坏死和严重充血等病理现象；溶血试验显示给药组与对照组比较,尿胆原的吸收值没有显著性差异(P>0.05),血常规检查给药组和对照组也没有显著差异(P>0.05)。说明蜂胶注射液对肌肉没有刺激作用,无体内溶血作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号及缩略语说明
• 前言
• 第一章 文献综述
• 一、蜂胶的性质及其化学成分研究
• 1. 理化性质
• 2. 化学成分
• 二、蜂胶的药理作用
• 1. 广谱抗菌
• 2. 抗真菌
• 3. 增强免疫
• 4. 抗氧化
• 5. 抗病毒
• 6. 抗炎镇痛
• 7. 抗肿瘤
• 三、蜂胶中残留的毒性成分的测定方法
• 四、蜂胶的毒副作用
• 1. 一般毒性
• 2. 蜂胶提取物的特殊毒性
• 3. 蜂胶提取物对皮肤的刺激作用
• 4. 蜂胶的过敏反应
• 五、蜂胶的提取
• 六、蜂胶的水溶工艺研究
• 七、蜂胶的应用
• 1 在人医临床上的应用
• 2 在农业上的应用
• 3 在畜禽生产中的应用
• 4 在兽医学中的应用
• 八、展望
• 参考文献
• 第二章 蜂胶活性成分的提取和总黄酮含量测定
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 蜂胶提取率
• 2.2 总黄酮含量测定
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 第三章 蜂胶提取物的体外抑菌效果研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 第四章 蜂胶提取物的安全性评价
• 试验一 蜂胶提取物的急性毒性试验
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 试验二 蜂胶提取物的亚慢性毒性试验
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 试验三 蜂胶提取物对小鼠精子畸形的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 试验四 蜂胶提取物的骨髓细胞微核试验
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 实验五 蜂胶注射液的肌肉刺激实验
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 试验六 蜂胶注射液的溶血试验
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 全文结论
• 致谢
• 附录
• 附录1:亚慢性毒性试验病理切片图
• 附录2:精子畸形试验图片
• 附录3:微核试验图片