腺病毒5型E1A基因绿色荧光蛋白真核表达载体的构建及其对大肠癌治疗作用的研究

腺病毒5型E1A基因绿色荧光蛋白真核表达载体的构建及其对大肠癌治疗作用的研究

论文摘要

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,常用的手术、化疗、放疗等传统的治疗方式均未能使其疗效得到明显的提高。自九十年代以来,肿瘤基因治疗已成为最引人瞩目的研究领域,是继手术、放疗、化疗、免疫治疗之后的第5种模式。人类腺病毒5型E1A基因(Ad5.E1A)是近年来新发现的一个抑癌基因。它能双向调控多种基因的表达,通过依赖及非依赖p53的途径诱导细胞程序化死亡,调控细胞周期,使细胞滞留在G1及G2期。ElA蛋白是多功能转录因子,它能从正、负两种途径调控多种基因的转录。目前,E1A基因抗肿瘤作用的研究,对大肠癌作为对象研究的较少。本研究通过构建真核表达质粒pEGFP-E1A,脂质体介导转染大肠癌细胞系LoVo细胞,经G418筛选获得稳定表达ElA基因的转染细胞LoVo-ElA,在体外探讨了ElA基因对大肠癌细胞系LoVo细胞体外生长的抑制作用和化疗增敏作用,对比LoVo-E1A、LoVo-vect、LoVo细胞在生长速度、倍增时间、软琼脂集落形成能力、对化疗药物的敏感性的等方面的变化。建立了大肠癌细胞系LoVo-E1A、LoVo-vect、LoVo细胞的裸鼠人工荷瘤动物模型,在体内探讨了E1A基因在体内对LoVo细胞的作用,通过LoVo-E1A、LoVo-vect以及LoVo细胞在裸鼠体内生物学性状的差别,以及模拟E1A基因治疗裸鼠实验,观察E1A基因及其与博来霉素联合应用在动物体内的疗效。通过对E1A基因与HER-2/neu基因及p185蛋白之间的关系的研究,探讨了E1A基因对大肠癌细胞抑制作用的机理。E1A基因的稳定表达明显抑制大肠癌细胞的恶性表型,降低其对裸鼠的致瘤性,说明E1A基因在大肠癌基因治疗中有重要意义,为其临床应用提供了理论和实验依据。

论文目录

  • 英文缩写词表
  • 前言
  • 第一篇:文献综述
  • 第一章 大肠癌基因治疗的研究进展
  • 第二章 E1A 基因治疗恶性肿瘤的研究进展
  • 第二篇:研究内容
  • 第一章 腺病毒5 型 E1A 基因绿色荧光蛋白真核表达载体的构建
  • 1 材料
  • 2 方法
  • 3 结果
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第二章 E1A 基因对LoVo 细胞作用的体外实验研究
  • 1 材料
  • 2 方法
  • 3 结果
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第三章 E1A 基因对裸鼠移植瘤生长的抑制和化学治疗的增敏作用研究
  • 1 材料
  • 2 方法
  • 3 结果
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 功博期间发表的学术论文及其他成果
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 相关论文文献

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    • [2].E1A激活基因细胞阻遏子蛋白在人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2009(37)
    • [3].犬Ⅰ型腺病毒E1A蛋白的生物信息学分析[J]. 特产研究 2020(05)
    • [4].腺病毒E1A蛋白、CRP与COPD的相关性研究[J]. 宁夏医科大学学报 2015(03)
    • [5].PEI介导的E1A基因对结肠癌细胞放疗增敏效应的研究[J]. 辐射研究与辐射工艺学报 2011(02)
    • [6].E1A激活基因阻遏子基因表达与血管外膜成纤维细胞表型转化的关系[J]. 中国介入心脏病学杂志 2014(08)
    • [7].聚乙烯亚胺介导的E1A基因对肝癌细胞的化疗增敏效应[J]. 徐州医学院学报 2009(11)
    • [8].E1A激活基因阻遏子对抗肿瘤坏死因子α引起的血管内皮细胞炎性损伤[J]. 中国动脉硬化杂志 2011(09)
    • [9].E1A激活基因阻遏子蛋白对抗人脐静脉血管内皮细胞的凋亡[J]. 中国组织工程研究 2012(46)
    • [10].E1A阻断ras诱导人成纤维细胞衰老机制的研究[J]. 南方医科大学学报 2011(08)
    • [11].E1A激活基因阻遏子基因-3600C/T多态性与早发冠心病的关联研究[J]. 中国实用内科杂志 2010(05)
    • [12].E1A激活基因阻遏子促进人血管内皮细胞VEGF分泌和单层通透性增加[J]. 中国病理生理杂志 2011(01)
    • [13].E1A激活基因阻遏子蛋白过表达可抑制人血管平滑肌细胞的迁移[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2011(37)
    • [14].E1A激活基因阻遏子在动脉粥样硬化血管中的表达及其与炎症因子的关系[J]. 心脏杂志 2016(01)
    • [15].人E1A激活基因阻遏子-Fc重组蛋白在小鼠肥胖中作用研究[J]. 临床军医杂志 2020(10)
    • [16].E1A激活基因阻遏子基因表达变化与颈动脉血管重塑的关系[J]. 生物化学与生物物理进展 2015(02)
    • [17].腺病毒E1A蛋白对大鼠肺泡上皮细胞及人肺腺癌细胞凋亡的影响[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2010(05)
    • [18].COX-2启动子携带E1A的条件复制性腺病毒(Ad-COX-2-E1A)的构建及鉴定[J]. 中国老年学杂志 2010(24)
    • [19].7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达[J]. 细胞生物学杂志 2008(02)
    • [20].过表达E1A激活基因阻遏子对OxLDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响[J]. 郑州大学学报(医学版) 2019(02)
    • [21].E1A激活基因阻遏子蛋白与细胞膜受体IGF2R(11~13)结构域作用抑制人血管平滑肌细胞迁移[J]. 中国动脉硬化杂志 2012(11)
    • [22].E1A激活基因阻遏子在动脉粥样硬化血管中的表达变化[J]. 沈阳部队医药 2011(03)
    • [23].E1A基因对肝癌细胞放疗增敏作用及其机制探讨[J]. 江苏医药 2010(23)
    • [24].E1A激活基因阻遏子(CREG)过表达通过抑制p38/JNK信号分子活化对抗人血管平滑肌细胞凋亡[J]. 生物化学与生物物理进展 2009(12)
    • [25].强力霉素调控小鼠E1A激活基因阻遏子表达NIH3T3细胞系的建立[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2008(42)
    • [26].E1A基因对鼻咽癌放射敏感性影响动物实验研究[J]. 中华肿瘤防治杂志 2017(20)
    • [27].氧化应激对腺病毒E1A蛋白活化NF-κB转录活性的影响及其机制研究[J]. 中国应用生理学杂志 2010(04)
    • [28].腺病毒E1A基因对细菌脂多糖所致肺泡上皮细胞MMP-9/TIMP-1失衡的影响[J]. 内科理论与实践 2010(06)
    • [29].E1A基因下调人鼻咽癌细胞血管内皮生长因子的表达提高放疗敏感性[J]. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2008(20)
    • [30].E1A抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其分子机制[J]. 中南大学学报(医学版) 2008(07)

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