三苯双脒次级代谢物对笨二甲酸在中国健康志愿者体内排泄动力学研究

论文摘要

目的:1.建立灵敏度高、专属性强、方便可行的HPLC-UV法测定人尿液中三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓度。2.进行中国健康志愿者单次多剂量（200mg、400mg、600mg）口服三苯双脒肠溶片次级代谢物对苯二甲酸的排泄动力学研究,了解该代谢物在人体排泄规律及其剂量相关性,以对苯二甲酸排泄动力学过程描述三苯双脒药代动力学特征。3.进行中国健康志愿者进食和禁食单次单剂量（400mg）口服三苯双脒肠溶片次级代谢物对苯二甲酸的排泄动力学研究,了解食物对该代谢物人体排泄过程的可能影响,为制定科学、合理的三苯双脒肠溶片临床给药方案提供依据。4.观察中国健康志愿者口服三苯双脒肠溶片可能发生的不良反应,评价其安全性。方法:1.尿样经过稀释后,以阿魏酸为内标,以甲醇—1%醋酸（35:65,V/V）为流动相,采用Ultimate XB-C18柱（4.6mm×200mm,5μm）分离,紫外检测波长240nm,流速0.8mL·min-1,进样量20μL。2.16名男性健康志愿者,随机分配到三个剂量组（400mg组6人,其他两组5人）,分别单次口服200mg、400mg及600mg三苯双脒肠溶片,留取尿样,采用HPLC-UV法检测其尿液中三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓度,采用DAS2.0实用药代动力学程序计算代谢物对苯二甲酸人体排泄动力学参数,评价其剂量相关性。同期观察不良反应。3.6名男性健康志愿者,按照两种处理（进食和禁食）双周期交叉实验设计,分别禁食、进食后口服400mg三苯双脒肠溶片,留取尿样,采用HPLC-UV法检测其尿液中三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓度,采用DAS2.0实用药代动力学程序计算代谢物对苯二甲酸浓度人体排泄动力学参数,评价进食对三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸排泄动力学参数的影响。同期观察不良反应,评价其安全性。结果:1.健康志愿者单次口服三个剂量（200mg、400mg和600mg）的三苯双脒肠溶片后,血液中未检测到对苯二甲醛,HPLC-UV分析确定尿样中存在对苯二甲酸,证明三苯双脒进入体内迅速代谢,除生成对-（1-二甲氨基乙亚氨基）苯胺（以下简称氨脒）外,还转化为对苯二甲醛,对苯二甲醛进一步代谢为对苯二甲酸。2.HPLC-UV法测定人尿液中对苯二甲酸浓度,对苯二甲酸浓度在1～400μg·mL-1范围内线性关系良好,线性回归方程为Y=2.68e-002X-1.47e-003（r=0.9954）,最低定量限为1μg·mL-1,绝对回收率大于85%,相对回收率接近100%,批内、批间RSD均小于5%。符合生物样品分析要求,适合人体三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸排泄动力学研究。3.三组剂量（200mg、400mg和600mg）单次口服给药后,代谢物对苯二甲酸24h尿累积排泄率分别为37.00%±49.28%、32.90%±11.11%和37.85%±14.52%。用尿药法（残余药量法）计算三苯双脒代谢物对苯二甲酸半衰期t1/2分别为3.039±0.722h,2.425±0.761h和3.473±1.384h,尿药排泄速率常数Ke分别为0.238±0.056h-1,0.313±0.105h-1和0.225±0.079h-1。4.两组（进食和禁食）健康志愿者单剂量单次口服三苯双脒肠溶片代谢物对苯二甲酸24h尿累积排泄率分别为52.41±25.74%和32.90±11.11%:尿药法（残余药量法）计算对苯二甲酸半衰期t1/2分别为4.118±3.850h和2.425±0.761h:尿药排泄速率常数Ke分别为0.261±0.140h-1和0.313±0.105h-1。进食影响三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸尿累积排泄量。结论:1.健康志愿者单次口服三个剂量（200mg、400mg和600mg）的三苯双脒肠溶片后,血液中未检测到对苯二甲醛,HPLC-UV分析确定尿样中存在对苯二甲酸,证明三苯双脒进入体内迅速代谢,除氨脒外,还转化为对苯二甲醛,对苯二甲醛进一步代谢为对苯二甲酸。2.志愿者单次口服200、400和600mg三苯双脒肠溶片后,对苯二甲酸尿累积排泄量与给药剂量呈良好相关性,累积排泄率不随给药剂量增大而增大。3.双单侧t检验分析结果显示,食物对三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸尿累积排泄量有显著性影响,因此食物影响三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸排泄。4.整个试验过程顺利,志愿者依从性好,未见任何不良反应发生。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 缩略语明
• 前言
• 第一部分 人尿液中三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓度测定的方法学研究
• 1.材料与方法
• 1.1 药品与试剂
• 1.2 溶液配制
• 1.3 仪器
• 1.4 色谱条件
• 1.5 尿样处理
• 2.结果
• 2.1 专属性
• 2.2 标准曲线
• 2.3 定量下限
• 2.4 回收率和精密度
• 2.4.1 绝对回收率
• 2.4.2 相对回收率
• 2.4.3 批内和批间精密度
• 2.5 方法学质控
• 3.讨论
• 3.1 人尿液中对苯二甲酸浓度测定方法
• 3.2 质控样本
• 4.本部分结论
• 第二部分 健康志愿者单次口服不同剂量三苯双脒肠溶片次级代谢物对苯二甲酸排泄动力学研究
• 1.志愿者选择
• 1.1 纳入标准
• 1.2 排除标准
• 1.3 入选志愿者体检资料
• 2.药品、试剂与仪器
• 3.试验方法
• 4.尿样测定结果
• 4.1 健康志愿者药后各时间段尿药浓度、尿排泄量和排泄速率
• 4.2 对苯二甲酸累积排泄量和排泄速率一时间曲线
• 4.3 残余药量法计算对苯二甲酸排泄动力学参数
• 5.讨论
• 6.本部分结论
• 第三部分 食物对三苯双脒人体次级代谢物对苯二甲酸排泄动力学影响的研究
• 1.志愿者选择
• 1.1 纳入标准
• 1.2 排除标准
• 1.3 入选志愿者体检资料
• 2.药品、试剂与仪器
• 3.试验方法
• 4.结果
• 4.1 健康志愿者药后各时间段尿药浓度、尿排泄量
• 4.2 对苯二甲酸累积排泄量一时间曲线
• 4.3 残余药量法计算对苯二甲酸排泄动力学参数
• 4.4 进食对三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸排泄动力学影响的统计学分析
• 5.讨论
• 6.本部分结论
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文
• 学位论文评阅及答辩情况表