HCV单独感染者与HIV/HCV共感染者HCV病毒负荷和基因亚型研究

论文摘要

1.HCV单独感染者与HIV/HCV共感染者HCV病毒负荷研究[目的]了解人类免疫缺陷病毒（HIV）感染及艾滋病（AIDS）抗病毒治疗（ART）对丙型肝炎患者丙型肝炎病毒（HCV）负荷的影响。[方法]采用横断面研究设计,以HIV传播途径主要以既往采供血为主的山西省运城市和传播途径以静脉注射吸毒和性传播为主的云南省陇川县作为研究现场,以整群随机抽样方法将两地单独感染HCV （HCV抗体检测阳性）的社区人群及合并感染HIV和HCV的患者纳入本研究分析。对研究对象进行流行病学调查以了解其一般社会人口学、相关行为学特征和HIV感染相关免疫学、病毒学特征及接受艾滋病抗病毒治疗情况。对所有对象采集静脉血分离血浆进行HCV RNA定量检测。分析HIV感染、艾滋病抗病毒治疗及相关因素对HCV病毒负荷的影响。采用EpiData3.0和SPSS 16.0统计软件进行数据录入分析。[结果】本研究纳入2009年云南省陇川县整群抽样参与健康调查的社区人群及随访HIV感染者中HCV抗体阳性者共170人,其中25人为HCV单独感染,145人合并感染HIV。170名HCV抗体阳性对象中,男性占91.8%；平均年龄37.3±7.4岁；54.7%为景颇族,18.2%为傣族,17.1%为汉族,10.0%来自其他民族；文化程度77.6%在小学及以下。HIV感染途径主要为静脉注射吸毒,占82.1%（119/145）；68人（46.9%）正在接受ART。2004年及2006年分别纳入山西省运城市整群抽样参与健康调查的社区人群及闻喜县随访的HIV感染者中HCV抗体阳性者188人,其中20人为HCV单独感染,168人合并感染HIV。188名HCV抗体阳性对象中,男性占59.6%；平均年龄45.7土7.8岁；全部为汉族；70.2%文化程度在小学及以下。感染途径主要为供输血传播,占95.8%（161/168）；116人（69.0%）正在接受ART。云南省170名研究对象中,120人（70.6%）可以在血浆中定量检测到HCV RNA,检出率在HIV阴性、阳性对象中分别为64.0%和71.7%；山西省188名研究对象中,121人（64.4%）可以在血浆中定量检测到HCV RNA,检出率在HIV阴性、阳性对象中分别为70.0%和63.7%。对两地HCV RNA可检出者检测值取常用对数作正态性转换,经t检验发现合并感染HIV对log HCV RNA均数水平有显著影响,HIV感染使血浆HCV病毒负荷升高。而HIV感染人群中,接受ART与否均数无显著差别。这结果在云南、山西两地一致。分析HCV病毒抑制（<500 copies/ml）情况及其影响因素发现,云南省研究对象中50人（29.4%）病毒复制处于抑制状态。HIV感染状态对抑制率无明显影响（x2=0.613,P=0.434）；而HIV感染者中,接受ART的对象抑制率（17.6%）低于不接受对象（37.7%）,两者差别有统计学意义（x2-7.133,P=0.008）。经多元Logistic回归模型分析发现,调整各相关因素后,傣族人群病毒抑制率低于汉族（OR=0.18,95%CI：0.04-0.72）；文化程度在初中及以上者抑制率低于文盲（OR=0.25,95%CI：0.07-0.96）；HIV感染者中,不接受ART抑制率高于接受者（OR=3.10,95%CI：1.34-7.16）。山西省研究对象中67人（35.6%）血浆中HCV病毒负荷低于检测限,但HCV RNA抑制与各研究因素间均未发现有明显关联。[结论]HIV感染及艾滋病抗病毒治疗影响HCV患者血浆中HCV病毒负荷。合并感染HIV/HCV者血浆HCV病毒负荷较单独感染HCV者高；云南地区接受ART人群血液中HCV病毒抑制率较低。病毒抑制受ART、民族与文化程度影响,但影响因素与特征在不同地区有所不同。提示应结合不同地区人群特征,加强对HCV/HIV合并感染者病程进展及病毒复制水平的动态监测与研究,及时开展针对性治疗。2.HCV单独感染者与HIV/HCV共感染者HCV基因亚型研究[目的]掌握我国云南省陇川县HCV单独感染者与HIV/HCV共感染者HCV基因亚型分布特征[方法]以第一部分所述云南省陇川县HCV单独感染与HIV/HCV共感染人群中,HCV病毒负荷处于定量检测限以上的120名患者为研究对象,应用PCR及巢式PCR方法扩增HCV基因组5’-UTR、C/E1和NS5B位置的目的片段,进行测序以确定HCV基因亚型。[结果]对120份HCV RNA载量达到检测限的样品进行5 -UTR区、C/E1区和NS5B区PCR扩增。5’-UTR区成功扩增116份样本,扩增成功率为96.7%。C/E1区和NS5B区经巢式PCR分别成功扩增出107份样品,扩增成功率均为89.2%。103例C/E1区与NS5B区均扩增成功的样本分型结论完全一致。对三个区域基因测序结果分别进行系统进化树构建。综合NS5B与C/E1两区域测序及分型情况,共得到111份（92.5%）样本的基因分型结果。其中3b型37例占33.3%,6u型32例占28.8%,6n型24例占21.6%,3a型11例占9.9%,1 a型5例占4.5%,6v型2例占1.8%。合并感染HIV/HCV者HCV亚型分布依次为：3b型34例占34.7%,6u型28例占28.6%,6n型21例占21.4%,3a型9例占9.2%,1 a型5例占5.1%,6v型1例占1.0%。单独感染HCV肯基因亚型分布依次为：6u型4例（30.8%）,6n与3b型各3例（23.1%）,3a型2例（15.4%）,6v型1例（7.7%）,未见1 a型。单独感染者HCV基因亚型分布特点与HIV/HCV合并感染者较为接近。5’-UTR区虽有最高的PCR扩增成功率,但在构建系统进化树后发现对个别基因型及亚型的区分能力有限,不能有效地区分1型与6型。[结论】我国云南省陇川县HCV感染者的HCV基因亚型主要构成为3b、6u、6n及部分3a、1a和6v。单独感染HCV者与HIV/HCV合并感染者的HCV基因亚型分布较为相似,提示在静脉注射吸毒流行的地区背景下,该地区普通人群与H1V感染者中HCV流行可能有相似的传播途径与来源。该地区HCV基因亚型与中国大陆以1b、2a型为主的流行特征有较大差别,与泰国、缅甸等国家基因型分布较为相似。表明云南地区HCV感染流行可能主要受东南亚国家影响。HCV基因分型方法以NS5B区、C/E1区扩增测序更为准确可靠,5’-UTR由于其高度保守,用于HCV分型时易发生错误判断。

论文目录

• 主要缩略语
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 HCV单独感染者与HIV/HCV共感染者HCV病毒负荷研究
• 对象与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 第二部分 HCV单独感染者与HIV/HCV共感染者HCV基因亚型研究
• 对象与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 附录
• 致谢