论文摘要
目的:应用基因芯片技术比较2 型糖尿病大鼠和正常大鼠肾脏组织基因谱表达的差异,探讨糖尿病肾病（DN）的发病机制。方法:（1）实验大鼠分两组,一组为正常对照组（10）,另一组为小剂量链脲佐菌素（STZ）加喂高脂饲料形成的2 型糖尿病大鼠组（12）;（2）造模期间监测体重、血糖、血脂、血清胰岛素、并行葡萄糖耐量试验;（3）分别从两组大鼠的肾脏组织中抽提mRNA,经逆转录后分别用Cy3、Cy5 荧光标记,获得两组动物来源的cDNA 探针;（4）将不同来源的cDNA 探针与含4000 个基因片段的芯片进行杂交,结果由扫描仪扫描并用软件进行统计分析;（5）根据芯片的结果挑选若干个有差异表达的基因,应用半定量RT-PCR 进行验证。结果:（1）12 周造模结束后,2 型糖尿病组大鼠与对照组相比体重显著增加,血脂升高,空腹血糖和空腹胰岛素水平升高,葡萄糖耐量试验明显异常,胰岛素敏感指数下降;（2）在4000 个基因中,筛选出两组大鼠肾脏组织中表达差异的基因共399 条,其中下降267 条,上调132 条;在2 型糖尿病大鼠肾脏基因中促进脂肪分解、氧化应激相关、细胞凋亡相关、胰岛素的分泌相关、系膜外基质合成及凝血功能相关的基因表达上调;促进葡萄糖利用、能量代谢相关、抗氧化相关、系膜外基质降解纤溶相关、胰岛素信号传导相关基因表达下调。（3）经半定量RT-PCR 法验证部分基因表达与芯片结果一致。结论:（1）本实验成功构建了实验性2 型糖尿病模型,它具有肥胖、高血糖、高甘油三酯血症、胰岛素抵抗等2 型糖尿病特征,是研究2 型糖尿病及其并发症的理想动物模型。（2）物质能量代谢障碍、氧化应激反应增强、凝血纤溶系统功能紊乱、细胞凋亡的增强等与2 型糖尿病肾病的发病有密切的关系。
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