论文摘要
目的:探讨Integrinavβ3干涉质粒构建及其对人视网膜血管内皮细胞株的影响。方法:（1）检测Integrinavβ3在人视网膜血管内皮细胞株的表达。（2）构建pGCU6-si-Integrin avβ3干涉质粒;（3）将pGCU6-si-Integrin avβ3转染人视网膜血管内皮细胞株,观察Integrin avβ3基因的表达变化;（4）Integrinavβ3干涉质粒对人视网膜血管内皮细胞粘附,迁移,增殖及凋亡能力方面的影响;（5）Integrinavβ3体内抑制视网膜新生血管的实验研究。结果:（1）Integrinavβ3正常条件下几乎无表达,但在低氧条件下表达明显增高,二者差异有统计学意义;（2）酶切鉴定和测序证明pGCU6-si-Integrin avβ3的重组质粒构建成功。（3）将pGCU6-si-Integrin avβ3转染人视网膜血管内皮细胞株,成功沉默了Integrin avβ3基因的表达;（4）Integrinavβ3干涉质粒能明显抑制该细胞的粘附,迁移,增殖及凋亡。（5）Integrinavβ3干涉质粒在小鼠体内明显减少突破内界膜的内皮细胞核数。结论:（1）低氧条件可明显诱导Integrinavβ3基因的表达;（2）构建了Integrinavβ3小干扰RNA表达质粒;（3）Integrinavβ3干涉质粒在mRNA和蛋白水平表达均被抑制;（4）Integrin avβ3干涉质粒能明显抑制细胞的粘附,迁移,增殖及凋亡;（5）Integrin avβ3干涉质粒在体内能明显抑制视网膜新生血管的发生。