大鼠脊髓损伤修复相关新基因Scirrl的基本特性及与脊髓损伤修复关系的研究

论文题目: 大鼠脊髓损伤修复相关新基因Scirrl的基本特性及与脊髓损伤修复关系的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 细胞生物学

作者: 刘涛

导师: 刘少君

关键词: 脊髓,损伤修复

文献来源: 中国人民解放军军事医学科学院

发表年度: 2005

论文摘要: 我们通过建立大鼠脊髓全横断损伤模型,以改良的锚定消减杂交技术构建了该模型的差异表达cDNA文库,经点杂交排除假阳性和半定量PCR验证,从中筛选到一批差异表达EST序列。本文对其进行生物信息学分析,选功能线索明确的新基因进行基本特性研究,以期对认识脊髓损伤修复的分子机理有所帮助。分析表明,这些EST序列分属40个不同基因,其中20个是新基因。信息学分析显示它们参与了广泛的细胞生命过程,再次说明了脊髓损伤修复的系统复杂性。本文成功克隆到其中新基因Scirrl的编码区序列,长144Obp,定位于1Oq12,该基因有5个外显子和4个内含子,编码蛋白SCIRRI具有“F-box+LRR”结构域,符合E3泛素连接酶中SCF家族底物结合亚单位的结构特征之一。实验表明SClRRI蛋白定位于细胞质。Scirrl基因在胚胎期特异表达于中枢神经系统且其时空表达顺序与中枢神经系统的发育进程一致,在成年动物中枢神经系统中则广泛分布,但尤以神经元功能活动频密的嗅脑、运动皮层、海马、梨状区、中央管周围灰质、脑桥灰质、巨细胞网状核、浦肯野细胞、红核、蓝斑和脊髓灰质第九板层运动神经元等部位为多,说明该基因对中枢神经系统的发育、对维持中枢神经系统尤其是活动频密的神经元的正常生理机能具有普遍意义;此外在检测的其它器官组织仅见于小肠绒毛表皮柱状细胞、胰脏A细胞和Ⅱ型肺间质细胞。制备了RNA杂交探针和特异性抗SCIRRI蛋白的兔抗血清,原位杂交和免疫组织化学结果均显示,大鼠脊髓全横断后,该基因mRNA和编码蛋白在大脑运动皮层以及脊髓灰质神经元中的表达明显增加,Western Blot结果也显示损伤后该基因编码蛋白在脊髓中的表达明显增加,说明该基因在脊髓损伤修复过程中可能发挥类似发育过程中的某种作用。

论文目录:

引言

第一部分脊髓全横断后高调表达的EST序列的生物信息学分析和功能注释

第一节 EST序列基因组电子定位及其代表基因的确定

第二节 Scirr1基因及其编码蛋白的计算分析

第二部分 Scirr1基因的基本特性研究

第三节 Scirr1基因编码区的克隆测序

第四节 SCIRR1蛋白的细胞定位

第五节 Scirr1基因的个体发生

第六节 Scirr1 mRNA在成年大鼠体内的表达分布

第七节 SCIRR1蛋白在成年大鼠脊髓中的表达分布

第三部分 Scirr1基因与脊髓损伤修复的关系

第八节脊髓全横断后中枢神经系统Scirr1 mRNA表达分布的变化

第九节脊髓全横断后中枢神经系统SCIRR1蛋白表达分布的变化

讨论

一、生物信息学分析在本文中的应用

二、关于SCIRR1蛋白的客观存在

三、关于Scirr1基因的基本生物学特性

四、关于Scirr1基因与脊髓损伤修复的关系

结论

参考文献

致谢

附录

缩略语

在学期间的其它工作任务

在学期间发表的论著

发布时间: 2005-09-05

参考文献

[1].新型神经组织工程材料的制备及其在周围神经和脊髓损伤修复中的应用[D]. 王树森.第四军医大学2004
[2].骨髓基质细胞移植促进大鼠脊髓损伤修复的实验研究[D]. 李雷.中国医科大学2005
[3].RNA干扰小鼠NgR基因表达促进脊髓损伤修复的实验研究[D]. 王朝鲁.吉林大学2007
[4].RNA干扰NOGO基因表达促进脊髓损伤修复的实验研究[D]. 孙红辉.吉林大学2007
[5].聚碳酸亚丙酯—壳聚糖微球复合电纺丝载药系统在脊髓损伤修复中的应用研究[D]. 夏同良.山东大学2016
[6].星形胶质细胞活化在脊髓损伤修复中的作用及其调控[D]. 袁一旻.第二军医大学2012
[7].BMSCs对脊髓损伤修复及其作用机制的研究[D]. 刘然.吉林大学2011
[8].神经胶质细胞在脊髓损伤修复中的作用及其机制研究[D]. 苏志达.第二军医大学2008
[9].局部释放夫拉平度调控局部星形胶质细胞和炎症反应促进脊髓损伤修复[D]. 任浩.浙江大学2017
[10].Raf/Erk1/2/Merk信号传导通路在脊髓损伤修复中的病理机制研究[D]. 曹富江.天津医科大学2013

大鼠脊髓损伤修复相关新基因Scirrl的基本特性及与脊髓损伤修复关系的研究

猜你喜欢