河南地区汉族人群血小板膜糖蛋白Iba基因多态性与冠心病相关性的研究

论文摘要

背景冠心病（coronary heart diseasc，CHD）是当今世界威胁人类健康的主要疾病之一。在20世纪60年代，人们认识到高血压、高脂血症、吸烟和糖尿病等是CHD的危险因素。然而在所有CHD的发病因素中，只有2／3可归结为这些可控的因素。近年来，越来越多的证据表明CHD是遗传易感性、环境因素的长期影响（激素、吸烟、超重）以及伴发的疾病（糖尿病、高血压、异常脂蛋白血症、高同型半胱氨酸血症）间相互作用的结果。冠状动脉内粥样斑块及破裂所致的血栓形成是CHD的病理基础。在高切变应力诱导下，血小板膜糖蛋白（glycoprotein，GP）受体复合物Ib-Ⅸ-Ⅴ，在血小板活化及血栓形成中起着关键作用，因而其和CHD的发生、发展过程密切相关。GPIb-Ⅸ-Ⅴ复合物中，GPIbα亚基的基因多态性可能影响到此受体的结构及表达数量，进而影响血小板的粘附、活化和聚集。目前国内外关于GPIbα基因多态性与CHD相关性的研究结论不一，较少大样本实验，且缺少几个位点间的联合分析。因此，更深入的研究CHD的发病原因，尤其是从基因水平着手研究，对预防和治疗CHD具有划时代的意义。目的针对血小板膜糖蛋白Ibα（glycoprotein Ibα，GPIbα）三种基因多态性：（1）位于起始密码子上游的Kozak序列多态性。（2）巨糖肽区串联重复序列（Variable Number of Tandem Repeats，VNTR）多态性。（3）人类血小板同种抗原（Human Platelet Alloantigens-2，HPA-2）多态性进行研究，了解上述基因在河南地区汉族人群中的分布情况，探讨上述基因多态性是否是我省CHD发生的遗传风险因子，及其与冠心病严重程度是否存在相关性，分析各基因多态性间是否存在协同作用。为人类群体遗传学、CHD病因学等提供理论资料。以期对CHD的临床预防以及治疗提供一定的参考依据。方法选取2004年9月～2006年2月河南省三所三级甲等医院心内科确诊为CHD的住院患者404例，包括不稳定心绞痛（unstable angina pectoris，UAP）患者161例，心肌梗死（myocardial infarction，MI）患者243例；并随机选取同期500例无心脑血管疾病家族史的健康体检者作对照。自全血中提取人基因组DNA，采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）或聚合酶链反应（PCR）分析方法检测HPA-2、Kozak序列及VNTR的基因型，分析三组基因在正常人群及CHD患者中的分布频率，对于行冠脉造影的患者，同时结合Gensini评分方法，探讨三组基因多态性与CHD的发生及病变严重程度的关系。结果1．HPA-2基因1．1中国河南汉族人群HPA-2基因存在MM、TM及TT3种多态性。1．2病例组和对照组人群的基因型分布经X2检验均符合Hardy-weinberg平衡，P＞0.05，具有人群代表性。1．3 TM+MM基因型在CHD组和对照组的分布差异具有统计学意义，P＜0.05。MI亚组、UAP亚组和对照组比较，TM+MM基因型的分布差异不具有统计学意义，P＞0.05。1．4 CHD组与对照组T，M等位基因分布差异同样具有统计学意义，P＜0.05，MI亚组、UAP亚组和对照组比较，T，M等位基因的分布差异不具有统计学意义，P＞0.05。1．5在CHD组、MI亚组及UAP亚组中，TT基因型与（TM+MM）基因型比较，冠状动脉病变严重程度差异不具有统计学意义，P值均大于0.05。2．Kozak序列基因2．1中国河南汉族人群kozak序列存在CC，TC及TT3种基因多态性。2．2病例组和对照组人群的基因型分布经X2检验均符合Hardy-weinberg平衡，P＞0.05，具有人群代表性。2．3与对照组比较，CC基因型在CHD组、MI亚组中的分布差异具有统计学意义，P值均小于0.05；其在UAP组和对照组中的分布差异不具有统计学意义，P＞0.05。2．4与对照组比较，T、C等位基因在CHD组、MI亚组及UAP亚组中的分布差异不具有统计学意义，P值均大于0.05。2．5在CHD组、MI亚组及UAP亚组中，CC基因型与（TT+TC）基因型间，冠状动脉病变严重程度差异不具有统计学意义，P值均大于0.05。3．VNTR基因3．1在中国河南汉族人群中，发现VNTR的6种基因型：AC、BC、BD、CC、CD、DD。3．2本研究未发现VNTR各基因型及等位基因与CHD、MI及UAP的发生存在明显相关性，P值均大于0.05。3．3在CHD组，CD基因型与其他基因型相比，Gensini冠状动脉评分≥40组与评分＜40组间的差异具有统计学意义，P＜0.05。4．基因间的联合分析4．1对HPA-2与VNTR基因进行联合分析，CHD组与对照组比较，CD+（TM+MM）基因型分布的差异不具有统计学意义，P＞0.05。4．2 Kozak序列与VNTR基因联合分析结果显示，CHD组与对照组比较，CD+CC基因型分布的差异具有统计学意义，P＜0.05。4．3对Kozak序列与HPA-2基因进行联合分析，CHD组与对照组比较，CC+（TM+MM）基因型分布的差异具有统计学意义，P＜0.05。4．4对HPA-2基因、Kozak序列、VNTR三基因的联合分析结果显示，（TM+MM）+CC+CD基因型在CHD组与对照组的分布差异不具有统计学差异，P＞0.05。5．各危险因素对MI影响的分析以MI作为因变量，HPA-2M（+）基因型、VNTR CD基因型、Kozak序列CC基因型、性别、年龄、糖尿病、高血压、吸烟、冠心病家族史及高脂血症作为自变量进行logistic回归分析，结果显示：年龄、糖尿病、高血压、吸烟为MI发生的独立危险因素。结论1．中国河南汉族人群存在HPA—2基因多态性、kozak序列-5T／C多态性和VNTR基因多态性。此三种基因多态性在人群的分布可能存在种族、地域差异。2．在河南汉族人群中，HPA—2基因多态性与冠心病的发生存在相关性，M（+）基因型可能是CHD发生的一种遗传危险因素。3．在河南汉族人群中，kozak序列-5T／C多态性与冠心病的发生存在相关性，CC基因型可能是CHD发生的一种遗传危险因素。4．在河南汉族人群中，血小板膜GPIbα基因巨糖肽区VNTR基因的CD基因型与CHD患者冠状动脉病变的严重程度有关。5．在河南汉族人群中，Kozak序列CD基因型+VNTRCC基因型；Kozak序列CD基因型+HPA-2M（+）基因型可能增加CHD患病风险。而其他联合基因可能不增加CHD患病风险。6．在河南汉族人群中，HPA-2M（+）基因型、VNTR CD基因型、Kozak序列CC基因型可能在环境因素及伴发疾病的相互影响下表现出其遗传易感性。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 论文部分 河南地区汉族人群血小板膜糖蛋白Ibα基因多态性与冠心病相关性的研究
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述部分 血小板膜糖蛋白受体GPIb-Ⅸ-Ⅴ复合物与CHD关系的研究进展
• 参考文献
• 后记
• 缩略词
• 攻读硕士学位期间发表论文情况
• 致谢