不同取穴方法对亚急性衰老大鼠的影响及其作用机制的比较研究

论文摘要

目的：研究针刺防治衰老的作用及其机理，通过对三组抗衰老穴位防治衰老作用机制的比较，旨初步观察抗衰老穴位是否存在特异性，穴位间是否存在拮抗及协同作用，为针灸抗衰老在穴位的选择和配伍上提供理论支持和实验依据。方法：采用健康Wistar大鼠作为受试对象，随机分为五组，即正常组、模型组、督穴组、体穴组、督体穴组。以D-半乳糖致亚急性衰老大鼠作为模型组，正常大鼠作对照，观察大鼠的一般状态及脑组织形态学改变，通过对自由基的影响、抗氧化防御能力、细胞膜离子转运活性及脑、肝组织蛋白表达等方面的检测，对针刺防治衰老的部分作用机制进行探讨，并对三组抗衰老穴位防治衰老的作用及其机理进行横向对比研究。结果：1．针刺对血清中抗活性氧能力和抗超氧阴离子自由基活力的下降，及对血清、肝组织中H2O2含量的升高均有一定的抑制作用，具有督体穴组作用较强，督穴组、体穴组差异不大的趋势及特点，这可能与针刺疗程长短有一定的关系；2．各针刺组抗脂质过氧化作用均比较全面，总体而言，在延缓T-AOC、SOD、CAT和GSH-PX含量降低，抑制MDA、NO和NOS含量升高方面督体穴组作用最强；对于改善脑组织抗氧化能力，督穴组作用较体穴组好；3．各针刺组均有不同程度延缓衰老大鼠脑、肝细胞膜Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性下降的作用，其中督体穴组作用最强：对于改善脑细胞膜离子转运能力，体穴组作用不及督穴组；4．各针刺组均有抑制脑、肝组织Bcl-2蛋白表达下降及Bax蛋白过度表达，从而抑制Bcl-2／Bax比值下降的作用，同时各针刺组还具有抑制脑、肝组织Caspase-3、p16蛋白表达升高的作用，体现出督体穴组作用最强；对脑蛋白表达的影响，督穴组较体穴组作用好；5．各针刺组均可延缓脑组织细胞形态的异常变化，督体穴组作用最好，督穴组次之。结论：1．针刺具有显著预防衰老的作用，其可能通过减少机体内自由基、提高机体抗氧化防御能力、增强细胞膜离子转运活性、抑制细胞凋亡和延缓因衰老所致的细胞形态学改变等方面实现的。2．针刺防治衰老的作用以督体穴组表现的最为全面和稳定，在改善脑组织衰老方面督穴组体现出相应的特异性，提示了抗衰老穴位间具有协同性和特异性的特点。3．针刺对机体内自由基浓度的升高具有一定的抑制作用，同时可增强机体的抗氧化能力，其作用较为全面，表现为延缓T-AOC、SOD、CAT和GSH-PX活性的降低，抑制MDA、NO和NOS含量的升高，从而提示，针刺防治衰老的作用可能与其通过多途径减少机体内自由基含量及抑制自由基的脂质过氧化反应相关。4．针刺具有延缓脑、肝细胞膜Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase活性下降的作用，由此提示其具有减少自由基对细胞膜的损伤，维持细胞膜稳定性的作用，这可能是其发挥抗衰老作用的机制之一。5．针刺具有抑制脑、肝组织Bcl-2蛋白表达和Bcl-2／Bax比值下降的作用，还具有抑制Bax、Caspase-3和p16蛋白过度表达的作用，从而说明针刺防治衰老作用的机理之一可能与其对细胞凋亡具有调控作用相关。6．针刺可延缓衰老大鼠大脑组织学超微结构的变化，通过维持细胞形态的正常，以确保其各项功能的发挥，从而起到预防衰老的作用，这可能是其作用机制之一。

论文目录

• 英文缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献综述
• 一、祖国医学对衰老的认识
• 二、现代医学对衰老的认识
• 三、针灸抗衰老的研究进展
• 实验研究
• 实验一 针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠自由基的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 主要试剂
• （三） 主要仪器设备
• 二、实验方法
• （一） 衰老动物模型的制备
• （二） 动物分组及处理
• （三） 动物模型复制成功标准
• （四） 针刺方法
• （五） 指标检测及方法
• 三、统计分析
• 四、实验结果
• 1.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠一般状态的影响
• 2.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清中抗活性氧能力影响的比较结果
• 3.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清中抗超氧阴离子活力影响的比较结果
• 2O₂含量影响的比较结果'>4.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清及肝组织中H₂O₂含量影响的比较结果
• 讨论
• 一、衰老动物模型的建立及评价
• 二、选穴、组方及立法依据
• 三、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠自由基的影响
• 小结
• 实验二 针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠抗氧化防御能力的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 主要试剂
• （三） 主要仪器设备
• 二、实验方法
• 三、统计分析
• 四、实验结果
• 1.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清中T-AOC影响的比较结果
• 2.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝组织SOD活力影响的比较结果
• 3.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝组织MDA含量影响的比较结果
• 4.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠肝组织CAT含量影响的比较结果
• 5.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠肝组织GSH-PX含量影响的比较结果
• 6.针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑组织NO、NOS含量影响的比较结果
• 讨论
• 一、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠T-AOC含量的影响
• 二、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠SOD活力的影响
• 三、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠MDA含量的影响
• 四、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠CAT含量的影响
• 五、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠GSH-PX含量的影响
• 六、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠NO、NOS含量的影响
• 小结
• 实验三 针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠细胞膜离子转运能力的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 主要试剂
• （三） 主要仪器设备
• 二、实验方法
• 三、统计分析
• 四、实验结果
• 讨论
• +-K⁺-ATPase活性的影响'>一、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝细胞膜Na⁺-K⁺-ATPase活性的影响
• 2+-Mg²⁺-ATPase活性的影响'>二、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝细胞膜Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase活性的影响
• 小结
• 实验四 针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠组织蛋白含量及脑组织海马区超微结构的影响
• 一、实验材料
• （一） 实验动物
• （二） 主要试剂
• （三） 主要仪器设备
• 二、实验方法
• 三、统计分析
• 四、实验结果
• 讨论
• 一、细胞凋亡与衰老的关系
• 二、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达的影响
• 三、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝组织Caspase-3蛋白表达的影响
• 四、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑、肝组织p16蛋白表达的影响
• 五、细胞凋亡与自由基及细胞膜离子转运能力的关系
• 六、针刺对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠脑组织海马区超微结构的影响
• 小结
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 一、脑组织海马区电镜
• 二、脑组织免疫组化
• （一） Bcl-2
• （二） Bax
• （三） Caspase-3
• （四） p16
• 三、肝组织免疫组化
• （一） Bcl-2
• （二） Bax
• （三） Caspase-3
• （四） p16
• 个人简介