LAT1在卵巢癌中的表达及临床意义

论文摘要

研究背景和目的氨基酸是细胞内组成蛋白质的基本单位,并对细胞代谢和增殖有着重要作用。迄今为止已发现的二十多种氨基酸转运蛋白中,L型氨基酸转运蛋白是Na+非依赖型的,包括LAT1、LAT2、LAT3和LAT4四种,它们主要转运中性氨基酸、支链氨基酸、芳香族氨基酸和一些必需氨基酸。目前研究发现,LAT1在多种癌症组织中高表达,如肺癌、食管癌、星状细胞瘤等。日本学者研究发现,在卵巢癌组织中LAT1的表达也明显升高,但其与卵巢癌临床病理特征及预后之间的关系目前尚不明确。卵巢癌是妇科三大恶性肿瘤之一,病死率居首位。目前,手术和化疗是其主要的治疗手段。铂类作为一线化疗药物长期用于晚期卵巢癌的治疗,但其肾毒性、骨髓抑制以及耐药性的问题使其临床应用受到一定的限制。因此寻找某种新药物增强铂类的化疗敏感性尤其重要。本实验旨在通过用免疫组织化学方法检测LAT1在卵巢正常组织、良性肿瘤、交界性肿瘤及卵巢癌组织中的表达,分析其与卵巢癌临床病理参数间的关系及LAT1表达在卵巢癌中的预后意义,并探讨LAT1抑制剂2-氨基双环-（2,2,1）-庚烷-2-羧酸（BCH）联合顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其可能的分子机制,从而为卵巢癌的治疗寻找新的可能途径。材料及方法1.本研究所选用的189例卵巢癌及13例正常卵巢、15例良性肿瘤、15例交界性肿瘤组织标本均取自山东大学齐鲁医院病理科2004年12月至2009年6月的石蜡包埋组织标本。2.免疫组织化学方法检测卵巢癌组织中LAT1的表达情况,分析LAT1的表达率与卵巢癌临床病理参数间的关系及其对预后的影响。3.人卵巢癌SKOV3细胞经不同浓度的BCH及BCH联合顺铂处理后,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性；4. Western blot检测BCH对mTOR通路的影响。5.统计学方法：采用SPSS13.0软件对实验数据进行统计学分析,以P<0.05认为差异有统计学意义。结果1.LAT1在卵巢癌组织中表达明显增高（P<0.001）,且其在卵巢癌组织中的表达率与组织学分级（P=0.03）、FIGO分期（P=0.011）、大网膜转移（P=0.046）明显相关；Kaplan—Meier生存分析显示,LAT1表达阳性者的预后较差（P<0.001）。COX比例风险模型多因素分析显示,LAT1阳性表达（P=0.001）、残余病灶直径（P=0.045）是影响卵巢癌预后的独立因素。2.单用BCH可显著抑制SKOV3细胞的增殖,并呈现一定的时间-剂量依赖性。联用顺铂较之单独用药组,细胞活性明显降低（P<0.01）,且BCH在顺铂之后应用时抑制作用更为明显（P<0.05）。3. Western blot示BCH可抑制nTOR、p70S6K和4E-BP1的磷酸化,从而阻断mTOR通路。结论1.卵巢癌中LAT1蛋白表达增高,并且与组织学分级、FIGO分期、大网膜转移相关,LAT1表达阳性的卵巢癌患者预后不良。2.LAT1抑制剂BCH单用及联用顺铂均可显著抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖,且BCH在顺铂之后应用时抑制作用更为明显,呈现协同作用,其作用机制可能与mTOR通路的阻断有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 第一部分 LAT1在卵巢癌中的表达及其预后意义
• 前言
• 资料及方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 第二部分 LAT1抑制剂BCH联合顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用
• 前言
• 材料及方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图附表
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表论文
• 学位论文评阅及答辩情况表