论文摘要
目的1评价补肺健脾法、补肺益肾法和益气滋肾法对COPD的疗效及其远后效应,并探讨其作用特点。2探讨补肺健脾方、补肺益肾方和益气滋肾方治疗COPD的机制,揭示其远后效应机制。方法大鼠随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组和氨茶碱组,每组20只。采用香烟熏吸联合反复细菌感染的方法制作COPD稳定期大鼠模型,于第9周开始分别给予相应的药物治疗至第20周,半数取材,其余动物正常饲养至第32周,取材。检测大鼠肺功能(TV、PEF、EF50)、外周血和支气管肺泡灌洗液(bronchio-alveoli lavage fluid, BALF)中白细胞(white blood cell, WBC)计数和中性粒细胞比率、肺组织病理(支气管管壁厚度、支气管管腔狭窄程度、单位面积肺泡计数和肺泡直径、肺小血管壁厚度)、血清和BALF中细胞因子(IL-1p、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-a和可溶性TNF受体)等。结果1一般情况模型组大鼠较对照组形体消瘦,精神倦怠,活动减少,进食量、饮水量减少,大便溏薄,垫料潮湿等,3个中药组(补肺健脾组、补肺益肾组和益气滋肾组,下同)和氨茶碱组可以改善上述变化,其中以补肺健脾组和补肺益肾组尤为明显。各组大鼠的体重随周龄增长逐渐增加。模型组大鼠体重增长趋势较对照组缓慢(P>0.05)。3个中药组和氨茶碱组体重自第12周增长趋势较模型组加快,但对照组、模型组、3个中药组和氨茶碱组间无显著统计学差异(P>0.05)。2肺功能模型组TV、PEF、EF50水平从第4周开始较对照组明显降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,3个中药组从第16周起即可明显改善PEF和EF50水平(P<0.05或P<0.01),TV值也从第20周起明显升高(P<0.05或P<0.01);氨茶碱组仅在第20周和第28周时PEF值升高明显(P<0.05)。在32周的观察期间,3个中药组和氨茶碱组间TV、PEF、EF50水平无显著差异(P>0.05)。3外周血中WBC计数及中性粒细胞比率第20、32周时,模型组外周血WBC计数和中性粒细胞比率较对照组有升高趋势,但无显著统计学差异(P>0.05)。4BALF中WBC计数及中性粒细胞比率模型组WBC计数第20、32周时均较对照组均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,3个中药组第20、32周时均显著降低(P<0.01);氨茶碱组第20周时降低明显(P<0.05),第32周时无显著差异(P>0.05)。与氨茶碱组相比,补肺健脾组第20、32周时均明显降低(P<0.05或P<0.01);补肺益肾组和益气滋肾组第32周降低明显(P<0.05)。3个中药组间无统计学差异(P>0.05)。对照组、模型组、3个中药组和氨茶碱组间中性粒细胞比率无明显差异(P>0.05)。5肺脏病理第20、32周时,模型组支气管壁厚度、支气管狭窄程度、肺泡平均直径以及肺小血管壁增厚等值均较对照组显著增高(P<0.01),单位面积肺泡数明显减少(P<0.01),3个中药组及氨茶碱组与模型组相比上述病理明显减轻(P<0.05或P<0.01);且在第32周时,3个中药组在改善支气管壁厚度、肺泡大小和肺小血管壁增厚方面明显优于氨茶碱组(P<0.01),而3个中药组间无显著差异(P>0.05)。6血清细胞因子第20周时,模型组血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、可溶性TNF受体水平均较对照组明显升高(P<0.01)。3个中药组上述细胞因子水平均较模型组显著降低(P<0.01)。其中,益气滋肾组IL-1β、IL-10、TNF-α水平显著低于补肺益肾组(P<0.01);补肺健脾组IL-6、TNF-α水平较补肺益肾组和益气滋肾组显著降低(P<0.05或P<0.01);益气滋肾组IL-8水平较补肺健脾组和补肺益肾组明显降低(P<0.05);补肺健脾组和益气滋肾组可溶性TNF受体水平均较补肺益肾组明显降低(P<0.01)。3个中药组血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、可溶性TNF受体水平均较氨茶碱组明显降低(P<0.01)。第32周时,3个中药组IL-1β、IL-8、IL-10、TNF-α水平仍较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01);补肺健脾组和补肺益肾组中IL-6、可溶性TNF受体水平均较益气滋肾组和氨茶碱组明显降低(P<0.01)。补肺健脾组IL-8水平较益气滋肾组明显降低(P<0.05);补肺健脾组和补肺益。肾组IL-10、TNF-α水平较益气滋肾组明显降低(P<0.05或P<0.01)。7BALF中细胞因子第20、32周时,模型组IL-8、IL-10、TNF-α水平均较对照组明显升高(P<0.01);3个中药组上述细胞因子水平均较模型组显著降低(P<0.01)。其中,第20周时益气滋肾组IL-8、IL-10水平较补肺益肾组降低显著(P<0.05或P<0.01);补肺健脾组TNF-α水平较补肺益肾组和益气滋肾组降低显著(P<0.05或P<0.01),益气滋肾组TNF-α水平明显低于补肺益肾组(P<0.01)。而第32周时,补肺健脾组和补肺益肾组IL-8、TNF-α水平较益气滋肾组改善明显(P<0.05或P<0.01);补肺益肾组IL-10水平较益气滋肾组明显降低(P<0.01)。3个中药组IL-8、IL-10、TNF-α水平均较氨茶碱组显著降低(P<0.01)。8相关性分析支气管狭窄程度与血清中IL-8、IL-6、IL-10、IL-1p、TNF-α和可溶性TNF受体水平显著正相关(r=0.643、0.657、0.619、0.641、0.648、0.663,P=0.000),与BALF中IL-8、IL-10、TNF-α水平显著正相关(r=0.593、0.612、0.656,P=0.000);支气管壁厚度与血清中IL-8、IL-6、IL-10、IL-1β、可溶性TNF受体水平显著正相关(r=0.776、0.784、0.740、0.728、0.776、0.770,P=0.000),与BALF中IL-8、IL-10、TNF-a水平显著正相关(r=0.706、0.732、0.775,P=0.000);血管壁厚度与血清中IL-8、IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-α、可溶性TNF受体水平显著正相关(r=0.650、0.716、0.657、0.687、0.706、0.686,P=0.000),与BALF中IL-8、IL-10、TNF-α水平显著正相关(r=0.706、0.732、0.775,P=0.000);单位面积肺泡数与血清中IL-8、IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-a、可溶性TNF受体水平显著负相关(r=-0.494、-0.444、-0.490、-0.463、-0.432、-0.431,P=0.000、0.002、0.000、0.001、0.002、0.002),与BALF中IL-8、IL-10、TNF-α水平(r=-0.480、-0.484、-0.434,P=0.001、0.000、0.002)显著负相关;肺泡直径与血清中IL-8、IL-6、IL-10、IL-1p、TNF-a、可溶性TNF受体水平显著正相关(r=0.743、0.770、0.731、0.769、0.773、0.761,P=0.000),与BALF中IL-8、IL-10、TNF-α水平显著正相关(r=0.777、0.731、0.768,P=0.000)。结论1补肺健脾方、补肺益肾方和益气滋肾方可以明显改善COPD稳定期大鼠一般状况、肺功能、肺组织病理损害,具有显著疗效和远后效应。2COPD的肺脏病理改变与IL-8、IL-6、IL-10、IL-1p、TNF-a、可溶性TNF受体的水平密切相关,提示炎性反应损伤为COPD发生发展的重要机制之一3补肺健脾方、补肺益肾方和益气滋肾方对COPD稳定期大鼠具有较好的疗效和远后效应,其机制可能与参与调节炎性细胞因子水平有关,其中补肺健脾方和补肺益肾方在调节细胞因子水平方面的远后效应优于益气滋肾方。
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