丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抗肿瘤作用及其机制研究

丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抗肿瘤作用及其机制研究

论文摘要

目的:探讨丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抗肿瘤作用及其作用机制,为抗肿瘤新药研制、开发提供科学依据。方法:1.细胞计数法绘制人乳腺癌MCF-7细胞和人肺腺癌A-549细胞的体外生长曲线;2.采用MTT法检测丰城鸡血藤H-103树脂提纯物分别作用于MCF-7细胞和A-549细胞24、48、72h后对两种细胞增殖的影响,并同时于倒置显微镜下观察各浓度组作用后细胞的形态改变;3.丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抑瘤机制实验,测定如下指标:(1)不同浓度丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用于MCF-7和A-549肿瘤细胞48h后,HE染色观察细胞形态的变化。(2)提取经不同浓度丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用48h后两种腺癌细胞的DNA,应用琼脂糖凝胶电泳法观察是否出现凋亡特有DNAladder。(3)化学发光法检测经丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用36h后两种腺癌细胞Caspase-3活性。结果:1.MCF-7细胞的对数生长期出现在细胞接种后的第3-5天,A-549细胞的对数生长期出现在细胞接种后的第2-6天;2.丰城鸡血藤H-103树脂提纯物在0.125-2mg/mL范围内对体外培养的MCF-7和A-549细胞均有不同程度的抑制作用,且这种抑制作用具有时效与量效性;3.(1)HE染色后2mg/mL丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用48h能够诱导MCF-7和A-549细胞出现较典型的凋亡形态。(2)DNA琼脂糖凝胶电泳图谱显示2mg/mL丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用48h后,MCF-7和A-549细胞均出现凋亡特有的DNAladder。(3)2mg/mL、1mg/mL丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用36h后,能够诱导MCF-7和A-549细胞内Caspase-3活性升高。结论:1.丰城鸡血藤H-103树脂提纯物0.125-2mg/mL范围内对MCF-7和A-549细胞均具有较强的抑制作用,且具有时效与量效性,同时其对MCF-7的抑制作用强于对A-549的作用;2.经丰城鸡血藤H-103树脂提纯物作用后,MCF-7和A-549细胞均在形态学和生物化学方面出现了典型的凋亡特征,而且细胞内Caspase-3活性较阴性对照组明显升高,说明诱导细胞凋亡可能是丰城鸡血藤H-103树脂提纯物抑制这两种细胞增殖的机制之一。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第1章 前言
  • 第2章 材料与方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验方法
  • 第3章 结果
  • 3.1 乳腺癌MCF-7细胞和肺腺癌A-549细胞生长曲线
  • 3.2 丰城鸡血藤H-103树脂提纯物对MCF-7和A-549生长的影响
  • 3.3 丰城鸡血藤H-103树脂提纯物对MCF-7和A-549细胞形态的影响
  • 3.4 丰城鸡血藤H-103树脂提纯物诱导MCF-7和A-549细胞凋亡
  • 3.5 丰城鸡血藤H-103树脂提纯物对MCF-7和A-549细胞Caspase-3的影响-
  • 第4章 讨论
  • 4.1 丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抑瘤作用
  • 4.2 丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抑瘤作用机制
  • 4.3 展望
  • 第5章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录 活血化瘀中药抗肿瘤作用机制研究进展
  • 攻读学位期间的研究成果
  • 相关论文文献

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