转录因子CaFlo8在白念珠菌形态发生和毒性表现中的功能作用

论文题目: 转录因子CaFlo8在白念珠菌形态发生和毒性表现中的功能作用

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 曹芳

导师: 陈江野

关键词: 白念珠菌,转录因子,形态发生,毒性表现

文献来源: 中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）

发表年度: 2005

论文摘要: 白念珠菌的形态转换是其致病性最重要的决定因素之一,这种形态变化受各种外界信号和细胞内信号转导途径的调控。转录因子Flo8在酿酒酵母形态发生中起关键作用,并受cAMP/PKA信号转导途径调控。为了证明白念珠菌中是否也存在类似的调控机制,我们通过功能互补实验,将白念珠菌基因组文库导入酿酒酵母单倍体flo8缺失株中,筛选能够互补或校正其侵入生长缺陷的基因,分离鉴定到8个新基因,包括FLO8的同源基因CaFLO8和PPE1的同源基因CaPPE1。CaFlo8与Flo8蛋白在全序列比较时同源性较低,但是N端的部分区域CaFlo8(30-92aa)与Flo8(72-154aa)高度同源。CaFlo8能够回复flo8缺失株的侵入和假菌丝生长缺陷,并能部分互补flo8缺失株的biofilm形成缺陷。通过序列比较和功能互补实验,我们确定了FLO8的同源基因CaFLO8。CaFlo8在酿酒酵母中具有转录激活作用,激活菌丝生长和侵入生长,这种激活作用绕过MAPK途径。利用lacZ作为报道基因分析CaFlo8的转录激活功能,发现CaFlo8蛋白N端的LUFS结构域和C端区域对其功能的发挥都有重要的影响,其中C端区域在转录激活过程中起主要作用。CaFLO8基因的敲除对白念珠菌的生长速度影响不大,但是对菌丝发育的影响很大,Caflo8缺失株在菌丝诱导的液体培养基中和固体培养基中都不能形成菌丝。Northern结果表明CaFlo8对菌丝特异基因的表达具有重要的调控作用,Caflo8缺失株中多个菌丝特异基因的表达和毒性相关基因的表达受阻。这种影响表现为剂量依赖,一个拷贝CaFLO8基因的敲除就能够影响表型的变化,减弱菌丝的形成和菌丝特异基因的表达。在小鼠系统感染试验中,Caflo8缺失株几乎没有毒性,

论文目录:

摘要

ABSTRACT

引言

材料和方法

1. 实验材料

2. 实验方法

结果和讨论

第一章白念珠菌CaFLO8基因的克隆及其在酿酒酵母中的功能作用

第二章 CaF1o8在白念珠菌中的功能作用

第三章白念珠菌CaPPE1基因的克隆及其在酿酒酵母形态发生中的功能作用

总结

参考文献

在学期间发表论文

致谢

发布时间: 2006-08-29

参考文献

[1].白念珠菌生物被膜形成相关基因的功能研究[D]. 曹颖瑛.第二军医大学2005
[2].白念珠菌多药耐药蛋白Cdr1p构效关系研究[D]. 高平挥.第二军医大学2006
[3].EAP2的双稳态表达主控白念珠菌白—灰形态的转换[D]. 黄广华.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）2006
[4].念珠菌胞壁葡聚糖某些结构、活性及分类鉴定意义的研究[D]. 李岷.中国协和医科大学1999
[5].白念珠菌烯醇化酶的研究[D]. 唐宁枫.中国协和医科大学2000
[6].白念珠菌菌相转换基因HYR1启动子活性研究[D]. 陈江汉.第二军医大学2006
[7].白念珠菌Swi/Snf复合物在白念珠菌菌丝发育中的功能研究[D]. 毛旭明.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）2006
[8].白念珠菌磷脂酶B的原核表达、纯化及功能验证[D]. 赵梓纲.中国人民解放军军医进修学院2011
[9].白念珠菌形态、胞壁多糖的结构及其免疫学活性的相关研究[D]. 刘泽虎.中国协和医科大学2009
[10].白念珠菌和酿酒酵母菌与TOR信号传导相关的基因功能鉴定[D]. 闫智慧.天津大学2009

转录因子CaFlo8在白念珠菌形态发生和毒性表现中的功能作用

猜你喜欢