论文题目: 急性肺栓塞的比较蛋白质组学研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 内科学
作者: 李圣青
导师: 戚好文,刘少君
关键词: 肺栓塞,蛋白质组学,病理生理,血清学诊断
文献来源: 第四军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 肺栓塞是血栓性或者其他性质的栓子(如气体、羊水、脂肪),顺着血流方向堵塞肺动脉的结果。绝大多数肺栓塞的栓子来源于下肢深静脉血栓(DVT)形成。肺栓塞的发病率和死亡率非常高。本研究采用大鼠急性肺栓塞模型,从肺组织和血清蛋白质组两方面着手研究,采用双向电泳技术和生物质谱鉴定技术,寻找肺栓塞后肺组织和血清中的差异表达蛋白,并对这些差异表达蛋白分子进行更进一步的深入研究和筛选,以期寻找到肺栓塞的特异性血清诊断标志物,同时进一步明确肺栓塞病理生理变化的分子机制,以期指导肺栓塞的临床治疗。 本研究首先构建了大鼠急性肺栓塞模型,该模型采用体外制备血栓再经颈总静脉回输的方法,比较贴近临床实际。取肺组织前,采用生理盐水进行肺灌注可以祛除肺组织内大量的血液成分,减少了血液中大量高丰度蛋白的污染。应用丙酮-TCA法提取肺组织蛋白,可以祛除盐离子、脂质、DNA、RNA等杂质的污染,从而在2-DE胶上得到更好的分离效果。本研究利用双向
论文目录:
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
一、肺栓塞的发病机理和病理生理研究进展
(一) PE的临床分类
(二) 血流动力学改变及血管内皮功能影响
(三) 呼吸系统病理生理改变
二、肺栓塞的诊断研究进展
(一) PE的症状及临床评估
(二) 肺通气/灌注显像
(三) 肺血管造影
(四) 螺旋CT血管造影
(五) 放射性核素血栓显像
(六) D-二聚体
三、蛋白质组学技术的发展及应用
(一) 蛋白质组学的概念
(二) 蛋白质组学研究技术
(三) 二维凝胶电泳
(四) 蛋白质组学的应用研究
正文
1.大鼠急性肺栓塞模型肺组织的比较蛋白质组学研究
1.1 肺组织蛋白样品的制备
1.2 第一向等电聚焦(IEF)
1.3 第二向SDS-PAGE电泳
1.4 2-DE胶的图像分析
1.5 差异表达蛋白的MALDI-TOF鉴定
1.6 部分差异表达蛋白的RT-PCR验证
1.7 部分差异表达蛋白的western-blot验证
1.8 部分差异表达蛋白的信息学分析
2.大鼠急性肺栓塞模型血清的比较蛋白质组学研究
2.1 双向电泳和图像分析
2.2 MALDI-TOF质谱鉴定及信息学分析
2.3 部分差异表达蛋白的western-blot验证
2.4 部分差异表达蛋白的信息学分析
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢
发布时间: 2005-07-19
参考文献
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