前列腺癌趋化抗原基因疫苗研究

前列腺癌趋化抗原基因疫苗研究

论文题目: 前列腺癌趋化抗原基因疫苗研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 免疫学

作者: 覃汉军

导师: 张叔人

关键词: 前列腺癌,疫苗,免疫治疗,基因枪

文献来源: 中国协和医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 为了更好地进行前列腺癌免疫基因治疗,我们构建一种新型的前列腺癌趋化抗原DNA疫苗,并通过基因枪介导的免疫研究其抗肿瘤效应及相关机制。 通过生物信息学技术分别从人前列腺特异膜抗原(hPSM)、小鼠前列腺酸性磷酸酶(mPAP)和人的前列腺特异抗原(hPSA)选取能表达多CTL和Th表位的DNA片段,利用RT-PCR和PCR技术将所选取的片段克隆并拼接成hPSM-mPAP-hPSA融合基因,即3P基因。以pcDNA3.1为载体在3P的5′端接次级淋巴组织趋化因子(SLC)而在其3′端接人IgG的Fc基因从而构建得新的DNA疫苗,称pSLC-3P-Fc。利用RT-PCR和Western Blotting技术分析验证pSLC-3P-Fc在其转染细胞中的表达,并应用趋化小室技术检测SLC-3P-Fc融合蛋白对人外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞的趋化活性。构建高表达3P小鼠黑色素瘤细胞株B16F10-3P,并利用同基因型的C57BL/6纯系小鼠建立荷瘤小鼠模型,进行pSLC-3P-Fc疫苗的肿瘤预防和治疗实验,观察荷瘤小鼠的肿瘤大小及生存期。为了分析CD4~+和CD8~+T淋巴细胞亚群的的作用,我们进行了淋巴细胞亚群的体内免疫删除实验。利用转染pSLC-3P-Fc的HLA-A~*0201~+PBMC诱导自身淋巴细胞产生CTL;通过乳酸脱氢酶释放法检测HLA-A~*0201~+限制性的CTL反应,并进行pSLC-3P-Fc

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实验材料

实验方法

结果

结论

参考文献

综述

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发布时间: 2006-10-13

参考文献

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