论文题目: 青蒿高效遗传转化体系的建立与青蒿素生物合成的分子调控
论文类型: 博士论文
论文专业: 植物学
作者: 韩军丽
导师: 叶和春,李国凤
关键词: 青蒿,根癌农杆菌,转化,丛生芽诱导率,青蒿素,法呢基焦磷酸合酶,过量表达
文献来源: 中国科学院研究生院(植物研究所)
发表年度: 2005
论文摘要: 青蒿素是从中国传统药用植物青蒿(Artemisia annua L.)中提取的新型抗疟特效药。青蒿素在国际市场上供不应求,而青蒿植株中青蒿素的含量很低,因此如何提高青蒿素的产量成为近年来研究的热点。通过基因工程获得转基因青蒿高产株系是提高青蒿素产量的最有潜力的途径之一。对不同基因型青蒿进行不同的激素浓度配比的比较研究,得到丛生芽诱导率较高、生根诱导率较高的激素配比,从而建立了青蒿高效再生体系。然后系统地分析了青蒿丛生芽诱导、丛生芽生长、丛生芽生根诱导对Kan的敏感性。对影响根癌农杆菌介导青蒿转化的转化效率的两个主要因素,即农杆菌类型和青蒿基因型,以及其它影响因素,即预培养时间、侵染液的组成、共培养的方式和时间进行比较研究,建立了根癌农杆菌介导的青蒿高效转化体系。本高效转化和再生体系的转基因植株的得率为4%至10%,而且转基因植株再生周期短,再生能力强。通过基因工程,在青蒿高产株系中过量表达本实验室从青蒿中克隆的FPS基因,结果转基因青蒿中FPS的酶活性是非转基因青蒿的2-3倍; 转基因青蒿的青蒿素含量最高可达0.9%(DW),是非转基因青蒿中青蒿素含量的1.34倍。这些结果进一步论证了FPS在青蒿素生物合成代谢中的调控作用。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
缩略语
第一章 青蒿素的研究进展
1 青蒿的栽培和育种
2 利用化学合成提高青蒿素产量
3 利用生物技术提高青蒿素产量
第二章 实验材料和方法
1 实验材料
2 实验方法
第三章 根癌农杆菌介导的青蒿高效再生和转化体系的建立
1 材料和方法
2 结果和讨论
第四章 过量表达青蒿法呢基焦磷酸合酶对转基因青蒿中青蒿素含量的影响
1 材料和方法
2 结果
3 讨论
参考文献
本工作取得的进展和今后研究方向
附:应用生物技术提高植物次生代谢产物的产量
1 植物次生代谢的细胞工程
2 植物次生代谢的基因工程
3 应用功能基因组学方法研究植物次生代谢途径及其调控机理
参考文献
博士期间发表的论文
致谢
发布时间: 2006-04-30
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