渐进性咬合紊乱对大鼠髁突软骨组织学及其TNF-α、OPG及RANKL表达变化的初步研究

论文摘要

咬合异常是颞下颌关节紊乱病（temporomandibular disorder,TMD）的重要病因之一。本课题组前期研究结果表明,渐进性咬合紊乱可以导致颞下颌关节髁突软骨异常改建,甚至出现退行性变。本研究以大鼠为实验对象,首次施加了二次分牙操作,建立了渐进性咬合紊乱模型,HE染色观察髁突软骨组织学变化及软骨厚度变化;免疫组织化学方法检测、阳性细胞面积百分比法分析髁突软骨中TNF-α、OPG、RANKL的表达特点。探讨咬合紊乱对髁突软骨内细胞的增殖与分化、软骨内成骨等活动的影响,进一步增加对咬合紊乱致髁突软骨改建的认识。选用48只8周龄SD（Sprague-Dawley）大鼠,雌雄各半,随机分为实验组和对照组各4个时间点,每组每性别3只。实验组:以皮筋弹性力推右侧下颌、左侧上颌第一磨牙近中移动,4周后同样方式推右侧下颌、左侧上颌第三磨牙远中移动,造成渐进性咬合紊乱动物模型。对照组:不作任何处理,同环境饲养。实验组和对照组中大鼠分别于放入最后一个皮圈后2、4、6、8周处死;取大鼠双侧颞下颌关节作HE染色,以及TNF-α、OPG、RANKL的免疫组化染色。结果如下:1、对照组和实验组大鼠左右侧髁突软骨厚度间无差异,故将双侧合并统计。雌、雄性大鼠厚度变化无明显差异,故合并统计。对照组内髁突软骨厚度随周龄增长呈逐渐减小的趋势,12、14、16周龄组均较10周龄组薄（P<0.05）,16周龄组较12周龄组薄（P=0.035）,而与14周龄组没有显著差异（P>0.05）。实验4、6、8周组的髁突软骨厚度较对照组显著增厚（P<0.05）,但实验2周组与对照组无明显差异（P=0.23）。实验组内6周组软骨厚度明显大于实验2、4、8周组（P<0.05）,而后三个时间组间没有明显差异（P>0.05）。2、TNF-α主要集中表达于髁突软骨的肥大层,对照组表达呈现逐渐升高的增龄性变化（P<0.05）。实验2、6、8周组表达显著高于同龄对照组,且6、8周组高于2周组（P<0.05）,实验4周组与对照之间无明显差异（P>0.05）,雌雄变化趋势相同。3、OPG主要表达于髁突软骨肥大层,对照组表达呈现逐渐降低的趋势（P<0.05）。雌性实验2、4、6、8周组阳性面积百分比与同龄对照组相比均呈现出增多的趋势（P<0.05）,且以实验6周组增多最为显著（P=0.001）。雄性实验2、4、6周组较同龄对照组表达均显著增强（P<0.05）,实验8周组较同龄对照组差异不明显（P=0.472）。4. RANKL集中表达于髁突软骨肥大层。雄性和雌性实验组均表现出以下规律:RANKL在2、6、8周表达较同龄对照组阳性表达面积均增大（P<0.05）,但实验4周组与其同龄对照组无明显差异（雄性P=0.201,雌性P=0.467）。雌性实验6、8周组阳性细胞表达较4周组强（P<0.05）,实验2、4周组之间差异不显著（P=0.342）。雄性实验2、6、8周组均较4周组表达显著增强（P<0.05）。通过上述实验得出以下结论:1、渐进性咬合紊乱可以导致大鼠双侧髁突软骨出现退行性改变,并伴有增殖反应,且这种组织学变化程度随渐进性咬合紊乱的程度加重、作用时间延长而更加明显。2、TNF-α、OPG和RANKL均参与了上述渐进性咬合紊乱所导致的髁突软骨病理性改建活动

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 实验一 咬合紊乱对颞下颌关节髁突软骨厚度的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 实验二 咬合紊乱对髁突软骨中TNF-α表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 髁突软骨TNF-α免疫组化染色结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 实验三 咬合紊乱对髁突软骨中OPG和RANKL表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 结论
• 全文总结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢