油茶蒲提取物抗氧化及抗癌活性研究

论文摘要

油茶蒲作为油茶加工的副产物,在实际生产中通常作为燃料使用或被废弃,造成了环境的污染和资源的浪费。近年来,一些研究表明油茶蒲具有较强的抗氧化活性。此外对其生物活性和药用价值的研究十分匮乏。因此,开发油茶蒲的医药保健功能是一项十分有意义的工作。本论文以课题组前期研究为基础,对油茶蒲提取物的成分、生物活性（抗氧化和抗癌活性）及安全性进行了一系列的基础性研究。（1）组成成分研究采用国标法对油茶蒲醇提物（50%乙醇提取物）中营养素的含量进行测定,结果表明:醇提物中总糖的含量达到了23.4 g/100g,其次是灰分,此外还含有少量的水分、脂肪和蛋白质。采用“四部位法”对醇提物进行分级萃取,得到乙酸乙酯相、正丁醇相和水分级相。采用Folin-Ciocalteau法对醇提物及其分级相的总酚含量进行测定。结果表明:多酚类化合物主要集中在极性较弱的乙酸乙酯相中,含量达到了39.3%。总酚含量依次为:乙酸乙酯相＞正丁醇相＞醇提物＞水分级相,与溶剂极性呈负相关。采用高效液相色谱法对醇提物及其分级相中特征成分（没食子酸（GA）、鞣花酸（EA）和3-甲基-鞣花酸-4′-O-葡萄糖苷（MEAG））的测定结果表明:大部分特征成分被富集在乙酸乙酯相中。正丁醇相的特征成分以MEAG为主,提示了可从正丁醇相中分离制备MEAG单体。水分级相中各特征成分的含量都较少。（2）抗氧化活性研究采用DPPH法、TEAC法、FRAP法、T-AOC法对醇提物及其分级相的抗氧化活性进行研究。结果表明:各样品都具有一定的抗氧化能力。四种方法的测定结果一致。抗氧化活性依次为:乙酸乙酯相＞正丁醇相＞醇提物＞水分级相。且抗氧化能力和总酚含量的相关系数都达到了0.9以上。其中乙酸乙酯相有很强的清除自由基能力,与阳性对照抗坏血酸相当。采用Rancimat法对醇提物及其分级相在猪油、茶油和甲鱼油中的抗油脂氧化能力进行研究。结果表明:样品在动物油体系中的抗氧化性较好。以乙酸乙酯相的抗油脂氧化能力最强。（3）抗癌活性研究体外酶学实验结果表明:醇提物及其分级相对FAS都具有一定的可逆抑制作用,活性大小依次为:醇提物＞正丁醇相＞水分级相＞乙酸乙酯相。对FAS的抑制作用与抗氧化间并不存在必然的联系。分级萃取各相间可能存在协同增效作用。MTT法结果表明:醇提物及其分级相对H460及A549的抑制活性依次为:正丁醇相＞醇提物＞乙酸乙酯相＞水分级相。在分级萃取各相中,以正丁醇相的活性最强。提示抗癌的有效成分可能主要集中在正丁醇相中。体内实验结果表明:醇提物具有一定抗肿瘤活性。以中剂量（150 mg/kg·d）的抑瘤率最高,达到了40%以上。（4）安全性评价小鼠急性经口毒性试验表明油茶蒲提取物属于实际无毒。综上所述,油茶蒲提取物具有较好的抗氧化活性、抗癌活性和安全性。开发以油茶蒲提取物为原料的抗氧化剂及抗癌产品具有一定的可行性,值得进一步研究。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 油茶蒲概述
• 1.2 植物多酚概述
• 1.3 植物多酚与抗氧化
• 1.3.1 氧化与自由基
• 1.3.2 植物多酚与抗氧化
• 1.4 植物多酚的抗癌活性
• 1.4.1 癌症概述
• 1.4.2 植物多酚的抗癌作用
• 1.4.3 癌症治疗的新靶点-脂肪酸合酶
• 1.5 本课题的主要研究内容
• 1.6 本课题的目的和意义
• 第二章 油茶蒲提取物的组成成分研究
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料、试剂和仪器
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.2.1 油茶蒲醇提物中常规营养成分及咖啡因含量测定
• 2.2.2.2 油茶蒲醇提物的分级萃取（四部位法）
• 2.2.2.3 油茶蒲醇提物及其分级相的总酚含量测定
• 2.2.2.4 油茶蒲醇提物及其分级相特征成分含量的测定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 油茶蒲醇提物中常规营养成分及咖啡因含量测定
• 2.3.2 油茶蒲醇提物四部位法分离结果
• 2.3.3 油茶蒲醇提物及其分级相中总酚含量的测定
• 2.3.3.1 没食子酸标准曲线
• 2.3.3.2 总酚含量
• 2.3.4 油茶蒲醇提物及其分级相中特征成分含量的测定
• 2.3.4.1 特征成分的高效液相色谱图谱
• 2.3.4.2 特征成分的标准曲线
• 2.3.4.3 油茶蒲醇提物及其分级相的HPLC图谱和特征成分含量
• 2.4 结论
• 第三章 油茶蒲提取物的抗氧化活性研究
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料、试剂和仪器
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.2.1 DPPH法测定油茶蒲醇提物及其分级相的抗氧化能力
• 3.2.2.2 TEAC法测定油茶蒲醇提物及其分级相的抗氧化能力
• 3.2.2.3 FRAP法测定油茶蒲醇提物及其分级相的抗氧化能力
• 3.2.2.4 T-AOC法测定油茶蒲醇提物及其分级相的抗氧化能力
• 3.2.2.5 油茶蒲醇提物及其分级相的油脂抗氧化能力
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 油茶蒲提取物清除DPPH·的能力
• +的能力'>3.3.2 油茶蒲提取物清除ABTS·⁺的能力
• 3.3.3 油茶蒲提取物的铁离子还原能力
• 3.3.4 油茶蒲提取物的全血抗氧化活性
• 3.3.5 油茶蒲提取物的抗油脂氧化能力
• 3.3.5.1 在猪油体系中的抗氧化能力
• 3.3.5.2 在山茶油体系中的抗氧化能力
• 3.3.5.3 油茶蒲提取物在不同油脂体系中的抗氧化能力比较
• 3.3.6 抗氧化能力与总酚含量的相关性
• 3.4 结论
• 第四章 油茶蒲提取物的抗癌活性及其机理初探
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 材料、试剂和仪器
• 4.2.2 实验方法
• 4.2.2.1 油茶蒲醇提物及其分级相对FAS活性的抑制作用
• 4.2.2.2 MTT法测定油茶蒲醇提物及其分级相对肺癌细胞的抑制作用
• 4.2.2.3 油茶蒲醇提物的体内抗肿瘤实验
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 油茶蒲醇提物及其分级相对FAS活性的抑制作用
• 4.3.2 MTT法测定油茶蒲醇提物及其分级相对肺癌细胞增殖的抑制作用
• 4.3.3 油茶蒲醇提物的体内抗肿瘤试验
• 4.4 结论
• 第五章 油茶蒲提取物的安全性评价
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 材料、试剂和仪器
• 5.2.2 实验方法
• 5.3 结果与讨论
• 5.4 结论
• 第六章 结论和展望
• 参考文献
• 作者简介及科研成果