大承气汤的血清药物化学研究

论文摘要

目的：通过建立大承气汤水煎剂及大鼠口服给药后血清的HPLC-DAD指纹图谱色谱分析方法,对大承气汤的血清药物化学方法进行研究,初步阐明大承气汤血中移行成分的来源,在一定程度上阐明大承气汤复方的配伍规律及药效物质基础。方法：首先,建立大承气汤水煎剂及其拆方的HPLC-DAD指纹图谱方法,用来描述其主要化学成分的信息,确保给药样品质量的稳定性。其次,利用所建立的指纹图谱分析方法,对口服大承气汤水煎剂及其拆方后的大鼠全血进行血中移行成分分析。摸索血清样品制备方法,建立大承气汤的血中移行成分指纹图谱。分析比较该复方体内、体外两种色谱指纹图谱,确定大鼠血中移行成分的来源,继而比较大承气汤、大承气汤缺芒硝、方中两药配伍及单味药的指纹图谱,确定血中各种移行成分的来源,阐明复方配伍规律。最后,根据血清移行成分的特点,选择性的对血清中某固定的特征性入血成分进行研究,找到给药后不同时间点该成分的代谢特点。结果：大承气汤复方体外可以明确标出的成分有58个,而其血中移行成分有37个,其中29个成分来源于复方中的原型成分,另外的8个为代谢物和新产生的物质。单味药大黄有入血成分25个,厚朴入血成分10个,枳实入血成分15个,主要入血成分在君药大黄中,佐证了大黄作为君药在复方中的作用。大黄厚朴配伍后主要入血成分共有26个,其中有15个成分来源于大黄,有2个成分来源于厚朴,有5个在单味药大黄和厚朴中都可以检测到,大黄、厚朴各有4个成分消失,另有4个为新产生的成分。大黄枳实配伍后主要入血成分共有27个,其中有9个成分来源于大黄,5个来源于枳实,有6个成分在单味药大黄和枳实中都可以检测到,大黄中有8个成分消失,枳实中有2个成分消失,另有5个为新产生的成分。厚朴枳实配伍后主要入血成分共有24个,其中有2个成分来源于厚朴,7个来源于枳实,有8个在单味药厚朴和枳实中都可以检测到,另有7个为新产生的成分。眼球取血时检测血清中某固定的特征性成分,不同给药方法下的体内分布水平变化规律基本一致,均随着给药时间的延长,色谱峰峰面积呈现先升高再降低的特点。结论：此血清药物化学研究方法适用于大承气汤的物质基础研究,其结果初步确定了复方血中移行成分的来源,也在一定程度上说明了大承气汤中的配伍关系,为进一步研究大承气汤物质基础奠定了基础。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 课题来源
• 1.2 课题研究背景及立题依据
• 1.3 大承气汤的研究概况
• 1.3.1 大承气汤组方原则
• 1.3.2 大承气汤的药效学研究概况
• 1.3.3 大承气汤的临床应用概况
• 1.3.4 大承气汤主要化学成分的研究概况
• 1.4 中药血清药物化学的研究概述
• 1.4.1 中药血清药物化学的提出
• 1.4.2 中药血清药物化学的研究现状
• 1.4.3 高效液相色谱法在血清药物化学中的应用
• 1.5 课题研究思路及研究内容
• 第2章 大承气汤体外成分HPLC-DAD指纹图谱的建立
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 主要仪器与设备
• 2.1.2 药品与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 大承气汤水煎剂样品处理
• 2.2.2 色谱条件的选择
• 2.2.3 各种给药样品的制备和标准品的配置
• 2.3 实验结果及分析
• 2.3.1 复方HPLC-DAD指纹图谱
• 2.3.2 大黄HPLC-DAD指纹图谱及所选标准品的标定
• 2.3.3 厚朴HPLC-DAD指纹图谱及所选标准品的标定
• 2.3.4 枳实HPLC-DAD指纹图谱及所选标准品的标定
• 2.3.5 各种给药样品HPLC-DAD指纹图谱
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 第3章 大承气汤血中移行成分HPLC-DAD指纹图谱的分析
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 主要仪器与设备
• 3.1.2 药品与试剂
• 3.1.3 实验动物
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 色谱条件
• 3.2.2 血清药物化学方法学的建立
• 3.2.3 血清样本采集
• 3.3 实验结果及分析
• 3.3.1 大承气汤血清药物化学研究结果
• 3.3.2 大承气汤血中移行成分来源认定
• 3.4 讨论
• 3.5 小结
• 第4章 大承气汤血中某些移行成分的代谢分析
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 主要仪器与设备
• 4.1.2 药品与试剂
• 4.1.3 实验动物
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 色谱条件
• 4.2.2 实验内容
• 4.3 实验结果及分析
• 4.4 讨论
• 4.5 小结
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文