论文摘要
本论文利用纳豆芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌对豆粕进行固态发酵,确定了豆粕固态发酵的工艺参数,并分析了原料豆粕和发酵豆粕中主要营养成分和短肽分布,分析了几种主要抗营养因子的变化情况,并对酶解豆粕和微生物发酵豆粕效果进行了比较分析。为开发出一种含有大量益生菌、蛋白酶、乳酸等生物活性物质,有利于动物消化吸收和生长发育等功效的豆粕发酵生物活性饲料奠定了基础。论文研究内容和结果如下:1.采用纳豆芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌对豆粕进行单菌、混菌发酵试验,最终确定了豆粕固态发酵的最适菌株是纳豆芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌,两菌按1:1比例混合:接种方式先接纳豆芽孢杆菌,发酵12h后再接凝结芽孢杆菌;接种量为10%;豆粕与麸皮质量比为7:3;发酵基质初始含水量为40%:初始pH为自然(6.5),发酵温度为37℃,发酵周期为48h。发酵豆粕中含有乳酸2.13%,纳豆芽孢杆菌活菌数为1.0×109cfu/g,凝结芽孢杆菌活菌数为9.2x 107cfu/g。在单因素试验的基础上,应用响应面分析法进行发酵条件优化,结果为:豆粕与麸皮质量比为7:3,含水量为40%,pH为6.6,发酵温度为38℃,发酵周期为48h,发酵豆粕中的纳豆芽孢杆菌活菌数为1.1×109cfu/g,凝结芽孢杆菌活菌数为9.8×107cfu/g,豆粕蛋白水解度达到20.24%。2.对原料豆粕和发酵豆粕的主要营养成分和生物活性物质进行了分析,其结果为:发酵豆粕中粗蛋白增加了4.70%,粗脂肪降低了8.69%,粗灰分降低了4.83%,粗纤维降低了10.6%,乳酸含量达到2.13%,益生菌含量为1.1x109cfu/g,其中芽孢形成为95%。发酵豆粕具有蛋白酶活性,发酵40h时酶活为2083U/g。豆粕大分子蛋白大部分被降解为短肽和氨基酸,采用Sephadex G-25凝胶层析方法确定了发酵豆粕的短肽的相对分子质量在617~1235之间。3.对发酵豆粕中主要的抗营养因子含量进行了测定,其中脲酶活性为0.010mgN/g·min,比原料豆粕下降了96.53%:胰蛋白酶抑制因子含量为50 U/g,比原料豆粕下降了97.35%;植酸含量为7.42 mg/g,比原料豆粕下降了28.65%b4.对酶法和微生物发酵法处理豆粕的结果进行了比较,结果显示:酶法处理后豆粕的蛋白水解度较高,为27.1%,水解条件易控制,作用时间短,但是成本较高,’水解物有苦味。微生物发酵法处理豆粕,能达到较高的水解度(20.2%),产品中还增加了益生菌、乳酸、蛋白酶等生物活性物质。
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