延边黄牛体细胞克隆早期胚胎的形态学研究

论文摘要

本试验以延边黄牛体细胞克隆早期胚胎为研究对象,采用组织学技术、组织化学技术和电子显微镜技术,对发育各期延边黄牛体细胞克隆早期胚胎的一般形态结构、糖原和脂质含量变化及超微结构特征进行了观察,结果表明:1.延边黄牛体细胞克隆早期胚胎内脂滴、糖原从2-细胞期到8-细胞期增多,从桑椹胚到囊胚减少,透明带内的糖元变化从2-细胞期到囊胚一直减少。2.延边黄牛体细胞克隆早期胚胎细胞连接在4-细胞期以微绒毛连接为主,8-细胞期以绒毛和间隙连接为主,桑椹胚和囊胚以桥类连接、中间连接和紧密连接为主。3.延边黄牛体细胞克隆早期胚胎各发育期均有线粒体、脂滴、空泡存在。4.延边黄牛体细胞克隆早期异常胚胎内线粒体数量少、脂滴聚集、卵裂球空泡化及细胞连接不紧密等因素的共同作用是造成体细胞克隆胚胎发育阻滞的主要原因。本研究结果将为建立和完善延边黄牛体细胞克隆早期胚胎的体外培养体系,提高延边黄牛体细胞克隆的效率提供科学的形态学理论依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略语对照表
• 前言
• 1 哺乳动物卵母细胞和早期胚胎的形态和特征
• 2 哺乳动物卵母细胞和早期胚胎内的主要能源物质
• 3 哺乳动物卵母细胞和早期胚胎的超微结构
• 4 研究的手段
• 5 本课题研究目的及意义
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 试验用延边黄牛体细胞克隆早期胚胎的采集
• 1.2 仪器
• 1.3 主要试剂
• 1.4 试剂配制
• 2 方法
• 2.1 延边黄牛体细胞克隆早期胚胎的构建
• 2.2 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎的测量
• 2.3 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎石蜡切片制作
• 2.4 H.E染色的方法
• 2.5 PAS反应方法
• 2.6 活细胞脂质染色方法
• 2.7 电镜样品的制作方法
• 结果
• 1 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎的一般形态
• 2 组织学观察结果
• 3 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎糖原观察结果
• 4 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎脂质染色结果
• 5 延边黄牛体细胞克隆早期胚胎透射电镜观察结果
• 讨论
• 1 试验方法的探讨
• 2 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎内糖原变化
• 3 延边黄牛卵母细胞和体细胞克隆早期胚胎内脂滴变化
• 4 延边黄牛体细胞克隆早期胚胎超微结构的观察
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介