论文摘要
内生真菌是存在于植物体内,但对植物的生长没有有害影响的一类微生物。内生真菌是普遍存在的,具有丰富的多样性,是一种巨大的潜在资源。本研究选择处于浙江天目山和上海来两个地区的樟科和木兰科13种植物为材料,通过对内生真菌的定殖率、分离率、种类组成、多样性指数、丰度等研究,揭示内生真菌的多样性与宿主的关系。不同的培养基对内生真菌的种类组成有一定的影响。通过4种不同的分离培养基对香樟进行内生真菌的分离,并比较他们在组成上的差异,发现不同培养基分到的内生真菌的数量没有差别,但是种类和多样性有差别。最合适香樟的分离培养基是PY和PDA。分别以香樟和紫玉兰为材料,确定樟科和木兰科植物分离内生真菌的最佳三步表面消毒方法为:75%乙醇1min,5%次氯酸钠3min,75%乙醇30s。樟科和木兰科植物的内生真菌具有丰富的物种多样性。从2科13种249株植物的6168个组织块中,共分离获得4189株内生真菌。最终鉴定为119个分类单元,属于75种32科15目,。其中77个鉴定到种、32个到属、还有10个分类单元只能放到科以上的分类地位。在这119个分类单元中,有4种担子菌,115种属于子囊菌。其中樟科植物分离到2400株内生真菌,鉴定为91个分类单元,属于54种30属16目,其中61个鉴定到种、22个到属,还有7个分类单元放到科以上的分类地位;在这91个分类单元中,,有87种子囊菌、4种担子菌。木兰科植物共分离到1789株内生真菌,其鉴定到79个分类单元,属于56种22科12目,其中56个鉴定到种、17个到属、还有6个分类单元放到科以上的分类地位;在这79个分类单元中,有77个分类单元是子囊菌、2个是担子菌。对樟科和木兰科内生真菌种类组成的比较分析结果显示,樟科和木兰科植物的内生真菌具有相似的定殖率,分别是52%和53%,但是木兰科植物分离率(0.73)高于樟科(0.65)。宿主的种类和季节对内生真菌的定殖率和分离率有明显的影响,不同植物的定殖率和分离率有明显差异,分别是30.6%-70.8%、0.34-0.94。夏季样品的定殖率和分离率高于秋季样品。宿主的种类、地理位置和季节对内生真菌丰度和多样性指数有明显的影响。天目山的植物多样性和丰度高于上海,夏季样品要高于秋季。不同植物之间多样性和丰度有明显差异,但是在宿主科的水平之间,多样性指数没有显著差异。宿主的种类对内生真菌的种类组成有明显影响,樟科和木兰科的优势种仅1个Phoma bellidis相同,分别有44.0%和35.4%的种类仅在一个科中出现。每个科中有20%的分类单元只出现在一种植物中,具有明显的宿主专一性。Leptosphaeria只在樟科中被发现,而Sporormiaceae sp只存在于木兰科中。有两个科的优势属没有宿主专一性,都有Phomopsis、Phoma、和Colletotrichum,樟科还有Diaporthe,但是有61.5%的属仅在一个科内出现,具有专一性。
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