粗裂地钱中黄酮化合物分析分离及抗氧化性研究

论文摘要

地钱作为中国传统中草药可以用来治疗皮肤烧烫伤、肺炎等,地钱（Merchantman）类植物中含有丰富的萜类和芳香化合物,其中一些化合物表现出良好的生物活性。研究表明,这些生理活性与地钱中所含的黄酮、萜类以及多糖等活性成分有关。目前对粗裂地钱中黄酮还未见深入研究,这极大地影响了粗裂地钱的有效利用。本文对粗裂地钱黄酮的提取、测定、分离纯化以及抗氧化活性进行了系统研究,为粗裂地钱及其活性成分的有效利用及综合开发提供了实验依据和理论基础。主要研究内容与结论概括如下：1.总黄酮的提取。试验采用了超声波和微波两种提取方法,考察了乙醇浓度、料液比、浸提温度、提取时间、微波功率、超声波功率等因素,通过单因素试验比较了不同方法下粗裂地钱黄酮提取率,结果表明超声提取率达1.35%大于微波提取率。2.黄酮类化合物HPLC分析。建立了粗裂地钱中四种黄酮类化合物的固相萃取-高效液相色谱分析方法。样品经70%乙醇溶液提取后,用C18固相萃取小柱预处理,采用甲醇：乙腈：0.5%乙酸（150：100：150,v/v）为流动相,C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）进行分离与测定。低、中、高浓度下方法的回收率为89.70%～97.95%,RSD小于4%。结果表明,该法简便快速,分析结果准确可靠,重复性好,可用于粗裂地钱中四种黄酮类化合物的含量分析。3.黄酮类化合物单体的分离鉴定。采用HSCCC方法对粗裂地钱乙酸乙酯和正丁醇萃取物中的黄酮化合物进行分离,同时结合HNMR、MS等仪器手段进行结构表征,从粗裂地钱中分离鉴定得到三个单体,分别为槲皮素、芹菜素和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。4.对粗裂地钱萃取物的活性进行了体外实验研究。实验结果表明,不同极性的萃取物具有不同的清除DPPH自由基、·OH自由基、O2-·自由基能力,并与样品使用浓度呈明显的量效关系。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 前言
• 1.2 地钱分布及形态特征
• 1.3 地钱植物化学成分
• 1.3.1 萜类化合物
• 1.3.2 黄酮类化合物
• 1.3.3 联苄类和双联苄类化合物
• 1.3.4 菲类化合物
• 1.3.5 其它化合物
• 1.4 地钱的药用历史
• 1.5 黄酮类化合物的研究概况
• 1.5.1 黄酮类化合物的提取方法
• 1.5.2 黄酮类化合物的分离纯化
• 1.5.3 黄酮类物质测定方法
• 1.5.4 黄酮类化合物生物活性
• 1.6 本课题研究目的和内容
• 第二章 粗裂地钱总黄酮提取与测定
• 2.1 超声提取
• 2.1.1 仪器与试剂
• 2.1.2 实验方法
• 2.1.3 结果与讨论
• 2.2 微波提取
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.3 结果与讨论
• 2.3 小结
• 第三章 粗裂地钱中黄酮类化合物高效液相分析
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 仪器和主要试剂
• 3.1.2 实验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 固相萃取条件的优化
• 3.2.2 色谱分离条件的选择
• 3.2.3 检测波长的选择
• 3.2.4 回归方程及检测限
• 3.2.5 方法的精密度
• 3.2.6 方法的回收率
• 3.2.7 样品测定
• 3.3 小结
• 第四章 粗裂地钱中黄酮类化合物的HSCCC分离研究
• 4.1 粗裂地钱乙酸乙酯萃取物的HSCCC分离研究
• 4.1.1 仪器与试剂
• 4.1.2 实验方法
• 4.1.3 结果与讨论
• 4.2 粗裂地钱正丁醇萃取物的HSCCC分离研究
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 实验方法
• 4.2.3 结果与讨论
• 4.3 小结
• 第五章 粗裂地钱中黄酮类化合物抗氧化性研究
• 5.1 实验部分
• 5.1.1 仪器与试剂
• 5.1.2 实验方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 羟基自由基清除结果
• 5.2.2 DPPH·自由基清除结果
• 5.2.3 超氧阴离子自由基清除结果
• 5.3 小结
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文